色谱爱好者之家

本人现在进行一个新药品种的HPLC分析，流动相中使用10mM的焦磷酸钠，使用一周之后，主峰保留时间明显前移且柱效下降。问过一个分析工程师，他说是焦磷酸盐对柱子的损伤很大，但他也搞不清为什么以及如何避免。

在此，请教高手们：伤害的原理是什么？可有替代品种？如果没有替代品种，该如何避免伤害，是否可以加入其他化合物来抑制伤害？

补充：本品种不加焦磷酸盐，出的色谱峰惨不忍睹！！！

我觉得你用的焦磷酸钠的作用是作为离子对试剂。

离子对试剂的使用应该注意下面几点：

1）浓度不能过高，个人觉得你的浓度高了，一般在-4数量级上；

2）缓冲液中的水不能过低，一般不应低于10%，当然这个不是确定的值，与你离子对试剂的种类和用量有关；

3）实验后要彻底清洗系统，可以采用比较流行的过度流动相冲洗过夜。

你的现象是保留值迁移并柱效下降，说明柱子堵塞，分配系数下降。建议你10%甲醇-水冲洗系统，并观察柱压和检测器信号的变化，及时处理应该柱子可以恢复使用的。

只能祝你好运了。

加磷酸盐不可以么？原理不清楚，用水多冲冲应该好点吧。

首先表示感谢！
焦磷酸钠在这里是缓冲盐、抗衡离子的作用，这个流动相中还有1mM的四丁基氢氧化铵，这是离子对试剂。流动相中盐溶液比例占85%，冲柱子时已经很注意，使用10%甲醇和纯甲醇交替冲，但是结果依旧很不理想！！！

朋友，用磷酸钠代替会如何？

用过磷酸盐，像磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、磷酸二氢铵等，基本没效果，保留很小且拖尾

焦磷酸钠使用过后请务必冲洗色谱柱，无论对设备还是对柱子都是一种保护。 否则析出的盐伤害设备，解离离子会破坏键合相，造成柱流失。

不知您化合物的酸碱性，您可以试一下两相中都加入0.01——0.1%的TFA在酸性条件下，看看结果如何；或者试着在碱性条件下做实验，比如在水相中加入 NH3或者10mM NH4HCO3

磷酸盐也可以作为离子对试剂，或许不满足你的要求？

劝你还是选个别的盐吧，焦磷酸钠可以和金属离子生成络合物，很可能是你的色谱柱金属离子含量不达标，而且色谱柱本身就是铁柱管，焦磷酸钠能与铁形成络合物，你说能好的了吗？