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标题:[未解决]空白血杂质跟主药如何分开

  [未解决]本主题悬赏 可用分 10  
ll5804[使用道具]
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空白血杂质跟主药如何分开

各位大侠,本人处理狗空白全血上液相感觉杂质很多主要在9分钟以前,问题是杂质峰拖尾影响后面的主药出峰,引起基线漂移,最郁闷的是主要出峰的位置空白血也有小峰,想调节流动相错开,调了几次但几乎都在一个位置出峰分不开,请问怎么办?
   新买的shim-pack C18柱子,柱温70,流动相先前用乙腈:甲醇:水=70:8:22,现在不用甲醇了,检测波长210nm.
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  • miracle   2010-6-8 15:28  专家分  +2   鼓励朋友,发起话题讨论!
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MNOD[使用道具]
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朋友,我想你应该用离子对试剂试试
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出国吧[使用道具]
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QUOTE:
原帖由 ll5804 于 2010-6-8 13:22 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
各位大侠,本人处理狗空白全血上液相感觉杂质很多主要在9分钟以前,问题是杂质峰拖尾影响后面的主药出峰,引起基线漂移,最郁闷的是主要出峰的位置空白血也有小峰,想调节流动相错开,调了几次但几乎都在一个位置出峰分不开,请问 ...

根据您说的情况看,是否没进行好前处理工作。如果是的话:建议您去除蛋白,细胞,盐等,过SPE柱
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  • miracle   2010-6-8 15:28  可用分  +3   谢谢您的热心应助!
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notrjhn[使用道具]
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要不跑跑剃度试试?
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dxkuii[使用道具]
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得知道您所要考察的是什么类型的化合物,杂质是什么类型的化合物。

根据化合物的类型,进行分析。

欢迎常来论坛大家一起讨论学习。
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  • miracle   2010-6-8 15:28  可用分  +3   感谢您对论坛的支持!
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sacred[使用道具]
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原因为三:一是样品进样量太多而造成过载;二是色谱柱有问题;三是流动相有问题,你可在流动相中加点吹尾剂(三乙胺)。
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piaoliang110mei[使用道具]
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柱温70要这么高要求,做了几次估计柱子也会坏呀.

如果杂质多要用预柱处理或者前处理.
如果流动相中加酸了请在水相和有机相中都加,现在很多地方都习惯只在水里加酸,其实两个相都加就可以克服基线漂移,这个我亲身实践过,即使是乙腈

如果不加的话也会出现漂移.
另外你的流动相比例有机相的起始比例太高,一般分析全血样品要用梯度洗脱更好.
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bing0421gs[使用道具]
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柱温那么高呀 ,你把流速降低,乙腈降低调试 不行就跑梯度吧
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wyznanhang[使用道具]
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9
 
也可以考虑一下改变其他条件对实验结果的影响!
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luffygonww[使用道具]
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朋友,可以考虑加点改性剂
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