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标题:【求助】大家跑电泳时会漏胶吗？

yapuyapu[使用道具]
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发表于 2013-11-19 15:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】大家跑电泳时会漏胶吗？


我好像每次都会漏点，不知有什么解决办法。请大家指点和讨论。
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junjie05[使用道具]
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发表于 2013-11-19 15:19 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

跑电泳怎么可能漏胶呢？

你说的是做胶的时候会漏吧！

不知道你用的是什么电泳槽？我们实验室用的是六一10*13cm的电泳槽,一开始是好的，后来就开始漏胶了。我们就用琼脂封。这里有一个小技巧，琼脂用3%左右浓度的，太浓或太稀都会导致漏液。
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am10[使用道具]
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发表于 2013-11-19 15:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

以前也有过这种情况，我的解决办法是。
下面有个胶皮垫，在上面涂上点胶水，然后 就不漏了。
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avi317[使用道具]
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发表于 2013-11-19 15:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
跑电泳怎么可能漏胶呢？

你说的是做胶的时候会漏吧！

不知道你用的是什么电泳槽？我们实验室用的是六一10*13cm的电泳槽,一开始是好的，后来就开始漏胶了。我们就用琼脂封。这里有一个小技巧，琼脂用3%左右浓度的，太浓或太稀都会导致漏液。

==============================================================================================================

是指跑电泳时，某孔的样品漏出孔外，当然是少量的，大部分还在原孔、跑在原泳道，在样品尚未到达浓缩胶和分离胶的分界面时，漏的胶的甚至漏到分界面了，很不好看。

我自己认为一部分原因是我加样时已漏出一些，还有是什么呢？
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zhenxin[使用道具]
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发表于 2013-11-19 15:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

呵呵，那不叫漏胶，一般都不会有这种现象发生。
如果发生了，建议是
　1　放少一点浓缩胶（即把胶孔作大一点）
　2　注意上样缓冲液的配方，必要的时候，加大甘油的用量。这样你的样品就会沉的很快－就象买来的MARKER一样。
　3　用枪加完后，稍停片刻再把枪提起，避免带起样品。
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rxcc33[使用道具]
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发表于 2013-11-19 15:26 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

早期的电泳槽制胶时需要琼脂封胶,漏一点是难免的.现在各生产厂家在自动封胶方面做了很多改进,基本解决了漏胶的问题.
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utt0989[使用道具]
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发表于 2013-11-19 15:27 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

<<<是指跑电泳时，某孔的样品漏出孔外，当然是少量的，大部分还在原孔、跑在原泳道，在样品尚未到达浓缩胶和分离胶的分界面时，漏的胶的甚至漏到分界面了，很不好看。
我自己认为一部分原因是我加样时已漏出一些，还有是什么呢>>>

我也遇到这样的情况，不知战友的问题是否已经解决，给我传授一下经验
我个人认为可能是
1 上层胶没有凝好，
2 倒掉用于压分离胶的水后，没有完全晾干
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yapuyapu[使用道具]
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发表于 2013-11-19 15:27 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

没有啊，怀疑是我上样技术不过关的缘故
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831226[使用道具]
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发表于 2013-11-19 15:29 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我也经常遇到此问题,我认为可能有两个原因:
1是玻璃板不干净,导致罐胶时空气进入.
2是蛋白浓度可能过高
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wmp1234[使用道具]
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发表于 2013-11-19 15:30 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我觉得你说的不叫漏胶应该叫漏液（样品跑到槽外电泳缓冲液中了）吧，有两个小建议你可以试试：1、减少上样量，试试10ul吧；2、上样的时候枪头要抵紧板子（靠外的玻璃板），看好了孔再缓慢连续的加，避免将样品加到槽外。
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