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标题:【求助】关于IEF水化的问题

shkudo[使用道具]
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【求助】关于IEF水化的问题

在Bio-rad的IEF电泳仪水化程序设置中有"主动水化"和"被动水化"两种选择,请问,这两种方法有何区别?它们对样品的处理各有什么优点?
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qhyu[使用道具]
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两种水化模式的区别在于

1. 主动水化反应是给胶条两端加上一个比较低的电压,促进样品进胶,一般伯乐的是 50V; 被动水化反应则是不加电压。

2. 主动水化过程可以促进大分子蛋白进入胶条, 但是同时会损失一部分小分子量蛋白

3. 一般温度(室温20度左右),采用被动水化;温度过低,为了避免样品在胶条表面析出,采用主动水化。(现在一般都是主动水化因为IEF都带自冷却系统,恒温17-20度, 所以还是用主动水化比较好)
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bamboo16[使用道具]
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请问我想得到小分子蛋白多肽多一点是不是采用被动水化好一点呢?
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dongdongqiang[使用道具]
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请问我这个是真么回事:


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shkudo[使用道具]
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上样量不是一般的大。。。。。。而且还是银染。。。。。。
平常18cm的胶做银染,200ug的量就足够了
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101010[使用道具]
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我使用2000ug的上样量效果不好。3000ug以前也由效果好的。我现在怀疑蛋白定量标准品和银染出问题。谢谢
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vivian4123[使用道具]
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上样量绝对过大了 对于银染来说~

3mg的上样量可以做考染~

可能是定量时出问题
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summerxx[使用道具]
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建议做考染,3mg做银染.....
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tangxin_80[使用道具]
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问题现在发现了,可能是:1、样品处理不过关,2、上槽液使用了已经使用国的液体,3、聚焦时间不够,时间改为8万VH.。附图
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tangxin_80[使用道具]
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图片怎么上不去啊


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