【求助】有哪位能帮我看下这个奇怪的图像？

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标题:【求助】有哪位能帮我看下这个奇怪的图像？

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发表于 2013-11-21 21:28 资料个人空间短消息加为好友

小中大

实验室采购回来的GE ettan six电泳设备，同时可以跑六块PAGE胶的那种，本人用的是18cm的ph3-10非线性胶条，每次跑的时候，图像中都会有一条向下凹陷的蛋白，有没有人遇到过一样的问题！？很急啊！有人说是那个位置有杂质或者气泡，但是***作的时候已经检查过了，没有肉眼可见的杂质和气泡呀！

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2013-11-21 21:28

93807165.jpg (25.92 KB)

2541[使用道具]
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发表于 2013-11-21 21:28 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 百分比 于 2013-11-21 21:28 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
实验室采购回来的GE ettan six电泳设备，同时可以跑六块PAGE胶的那种，本人用的是18cm的ph3-10非线性胶条，每次跑的时候，图像中都会有一条向下凹陷的蛋白，有没有人遇到过一样的问题！？很急啊！有人说是那个位置有杂质或者气泡，但是 ...

可能是电压不均匀造成的。

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发表于 2013-11-21 21:29 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 2541 于 2013-11-21 21:28 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

可能是电压不均匀造成的。

啥子电压呀，跑PAGE时候的电压吗，那怎么解决啊

mogu[使用道具]
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发表于 2013-11-21 21:30 资料个人空间短消息加为好友

小中大

可能是电压太大了，或是电泳槽内部漏液造成的

紫烟[使用道具]
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发表于 2013-11-21 21:30 资料个人空间短消息加为好友

小中大

1 凝胶聚合太快或者聚合时发生泄漏引起局部区域不均匀
2 第二项凝胶顶端不平整引胶条与它接触不好，似的琼脂糖固定液渗入两者之间的接触面空隙，或气泡或杂质渗入

这也是在某个论坛里看到当时记下来的

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发表于 2013-11-21 21:30 资料个人空间短消息加为好友

小中大

可能是电压太大了，或是电泳槽内部漏液造成的

==========================================================

漏液的话就不是我能解决的了，下次再观察下电压，再向你们请教！！！

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发表于 2013-11-21 21:31 资料个人空间短消息加为好友

小中大

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原帖由紫烟于 2013-11-21 21:30 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

1 凝胶聚合太快或者聚合时发生泄漏引起局部区域不均匀
2 第二项凝胶顶端不平整引胶条与它接触不好，似的琼脂糖固定液渗入两者之间的接触面空隙，或气泡或杂质渗入

这也是在某个论坛里看到当时记下来的 ...

1，凝胶聚合太快是怎么看啊，聚合时泄露也看不出来啊，因为整个配胶的槽子是没有发现有漏液的、
2，凝胶顶端的确是不好弄平整，每次用水封胶了，还是无法使胶条与PAGE胶顶端完全接触，总是有空隙

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发表于 2013-11-21 21:31 资料个人空间短消息加为好友

小中大

1，饱和正丁醇效果比水要好些，压的平整些，你可以试试
2，你在封胶的时候可以采用反灌法，就是先加琼脂糖在包埋胶条，这样就不会有气泡的产生
3，如果你的这个和现象和电泳液泄露有关的话，你就把上下槽都换成同样浓度的电泳液，就可以避免泄露所致的现象了，因为一旦泄露的话，就会导致电流不均匀，你的每块胶电泳的速度都会有差别

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发表于 2013-11-21 21:32 资料个人空间短消息加为好友

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QUOTE:

原帖由 birdfish 于 2013-11-21 21:31 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

1，饱和正丁醇效果比水要好些，压的平整些，你可以试试
2，你在封胶的时候可以采用反灌法，就是先加琼脂糖在包埋胶条，这样就不会有气泡的产生
3，如果你的这个和现象和电泳液泄露有关的话，你就把上下槽都换成同样浓度的电泳液，就可 ...

谢谢！
1，正丁醇好臭的呀
2，我一直都是用的这种反灌法的呀，
3，上下槽我一直都是用的相同浓度的电泳液，囧
做了近一年的二维电泳，无比艰辛啊，中途老板还给买了套新的GE的二维装置，可是用的好不习惯。。。再接再厉！！！

eric930[使用道具]
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发表于 2013-11-21 21:34 资料个人空间短消息加为好友

小中大

GE的说明上有。你这种情况就是灌胶时漏胶或胶聚合太快造成的。