蛋白质与蛋白组学

呵呵，希望大家响应啊，毕竟不是每个实验室都很富有的，希望集思广益，不断改进WB，最后整理出dxy特有的WB省钱省时超值protocol~~~

还有预染marker问题：
预染marker一般都很贵，尤其是伯乐等公司的，所以购买任何一家公司的预染marker都要在建议的上样量之后进行梯度稀释，如：建议5ul/lane,可以用3ul/lane,2ul/lane,1ul/lane，这样做一次预实验，一般是稀释一倍还可以用的。

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对于预染marker稀释之后跑胶的效果，8529334 朋友能否提供相关实验的结果图具体的看看呢？

我也说几点自己的体会：
1，配胶很多人是按照分离胶缓冲液 1.5mol/L Tris•HCl（pH8.8），浓缩胶缓冲液 0.5mol/L Tris•HCl（pH6.8），10％SDS 分开加的，其实这样麻烦，因为这三个在胶里的终浓度是不变的，分别是0.375M，0.125M和0.1％，因此可以把SDS直接分别加进分离胶以及浓缩教缓冲液，配成4x的BUffer直接配胶。
2，WB里面现用现配的有APS,脱脂奶粉封闭液，1抗2抗以及洗脱液，其他比如PBS/PBST,running buffer,trans-buffer,考马斯/立春红等都可配成高倍数的母液储存，用时稀释。
3，分离胶聚合时间长点好，因此可以提前一天配好封存后4度过夜，省时间。

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实验室一直采取储备液的方法，省了很多容器和配试剂的时间

SDS加到缓冲液中我没试过，但是一次不小心把SDS放冰箱了，结果析出好多结晶，缓冲液是放冰箱的，加上SDS的话有没有同样的析晶问题呢？或许浓度小点没关系？

有一次配了胶没跑电放冰箱了，明天跑胶结果条带特别难看，堪比鬼带，不知是不是浓缩胶分离胶同时放冰箱的问题。只能没跑完就停了，重新洗板，干燥，配胶，上样。