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标题:【求助】这是-70超低温冰箱的影响吗?

dior[使用道具]
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【求助】这是-70超低温冰箱的影响吗?


我的实验材料是水稻。一个是新鲜水稻(处理后直接水洗然后开始提蛋白),另一个是超低温冰箱保存了10个月的水稻(保存前先用自来水洗过超纯水又洗了3次)。同样的品种经过同样的处理。提蛋白的方法相同(药品和胶条也是同一批次)。IEF和SDS-PAGE的条件相同。图像扫描的条件相同。但是结果相差巨大!!!(注意哦,两张图的染色结果也不同,保存过的材料背景黑乎乎的)难道超低温冰箱保存会对蛋白有这么大的影响?还是其他的什么原因?我已经想破脑袋了。。。希望各位大侠帮我分析分析!多谢!
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dior[使用道具]
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这是新鲜材料


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dior[使用道具]
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这是超低温冰箱保存过的材料


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dior[使用道具]
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都是7cm 的胶条
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dior[使用道具]
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两种材料的蛋白浓度差不多,上样量都一样。
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bling[使用道具]
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-70超低温冰箱保存10个月时间太长,中间会发生很多事情,基本降解的可能性相当大。材料来源不麻烦的话还是建议重新取样做了。
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dior[使用道具]
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谢谢,今天开始准备用新鲜材料和超低温冰箱保存的材料做一次平行实验(从样品制备开始)。同时开始种水稻。
实验就这么被耽误了,不甘心啊~55
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dior[使用道具]
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只是有一个问题我不明白,如果蛋白被降解,怎么测蛋白含量的时候还会有吸收值呢?而且测得两种材料蛋白浓度差不多的。
谢谢!
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bling[使用道具]
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不知道你是用什么方法来测定浓度的,即使蛋白质被降解,还是以一种小分子量的蛋白质分子存在,一些测定方法还是能测出浓度的。
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dior[使用道具]
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QUOTE:
原帖由 bling 于 2013-12-1 23:39 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

不知道你是用什么方法来测定浓度的,即使蛋白质被降解,还是以一种小分子量的蛋白质分子存在,一些测定方法还是能测出浓度的。

我是用Bradford法。
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