小中大说得有道理.在我贴出的银染方案里,增敏就有不同的方法.实际上银染有两个类型,见下:
1分析型银染(不能用于质谱鉴定)-科学通报,2000,45:170-178
(1)水洗胶5min
(2)40%乙醇,10%乙酸固定1h
(3)5%乙醇,5%乙酸固定过夜
(4)水洗20min,重复2遍.
(5)5%戊二醛1h
水洗30min,重复4遍
(7)250ml新鲜配制的银氨液(1ml NaOH与5ml饱和氨水混合再加10ml 20%硝酸银)/胶45min
水洗3min,重复3遍
(9)1.5ml 1%柠檬酸,125ul 37%甲醛/胶显色.
(10)5%乙酸停显10min
(11)水洗10min,重复3遍.
2快速银染(和质谱鉴定相匹配)----Electrophoresis,2000,21:3666-3672
(1)水洗5min
(2)40%乙醇,10%乙酸重复固定15min,重复2遍
(3)30%乙醇,0.2硫代硫酸钠,6.8%乙酸钠30min
(4)水洗5min,重复3遍
(5)2.5%碳酸钠,0.04%的福尔马林(36%甲醛溶液)显影至背景出现
1.46% EDTA 溶液停显10min
(7)水洗10min,重复3遍.