蛋白质与蛋白组学 » 讨论区 » 经验共享 » 【求助】关于蛋白质预染marker的问题？

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 23  1/3 123››
 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:【求助】关于蛋白质预染marker的问题？

tie8[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 75844
精华 0
积分 442
帖子 543
信誉分 100
可用分 3571
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-28
状态 离线
1

发表于 2013-12-2 16:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】关于蛋白质预染marker的问题？


看到一些帖子或资料，在做western blotting时用到了蛋白质预染marker，有助于确定蛋白转膜的效果，我想请问大家，有谁用过蛋白质预染marker吗？所谓的预染，是什么意思？是跑完胶，不用加任何的试剂就可以直接看到marker的条带吗？然后转膜后，在膜上也可以看到marker的条带，比较胶上的条带与膜上条带的亮度，就可以确定蛋白转膜的情况吗？
不知道我理解的对不对？刚刚接触western blotting，很多东西都不会，请多多帮忙！十分感谢！

听说国产的蛋白质预染marker效果都不是很理想，请问是这样吗？如果是买进口的 蛋白质预染marker都哪个公司的比较好，价格也相对比较便宜的？
顶部
kulee[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77361
精华 0
积分 615
帖子 849
信誉分 100
可用分 5127
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-16
状态 离线
2

发表于 2013-12-2 16:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

预染marker是一些纯化好的蛋白混合物，通过与染料共价耦连，在电泳过程中或转膜过程中可以观察到。
通过膜上marker的情况可以估计转膜的效率，但不是绝对的。
国产的是不好用，每次需要加很多，而且条带也不清楚，Sigma的不错。
顶部
IAM007[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 75217
精华 0
积分 464
帖子 608
信誉分 100
可用分 3861
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-20
状态 离线
3

发表于 2013-12-2 16:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

电泳的时候就可以看到预染marker，转膜后也可以看到膜上有条带。现在国产的一些预染marker效果也还可以，毕竟制造工艺不复杂。
顶部
panda王[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 72140
精华 0
积分 852
帖子 1444
信誉分 100
可用分 7919
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-9-5
状态 离线
4

发表于 2013-12-2 16:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

嘿嘿，国产的怕还是不行，我刚买了一种八条带的国货，但是跑胶的时候怎么也数不到八条，指示作用很不理想，五六百块那。国外的我没用过不好说。
顶部
xingyi08[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76899
精华 0
积分 496
帖子 671
信誉分 100
可用分 4201
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-10
状态 离线
5

发表于 2013-12-2 16:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我刚刚买的预染maker，效果不好，好像被稀释了，条带也不清晰，好像被稀释了，上了10微升的量，也不是很好，有些同学说TAKARA的还好，你试试！
顶部
JK.jon[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 75188
精华 1
积分 528
帖子 652
信誉分 102
可用分 4146
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-10-20
状态 离线
6

发表于 2013-12-2 16:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

用过晶美的，还不错，
顶部
tie8[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 75844
精华 0
积分 442
帖子 543
信誉分 100
可用分 3571
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-28
状态 离线
7

发表于 2013-12-2 16:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

谢谢各位的回帖！我对预染marker有了一些了解，现在主要的问题就是定购哪家的预染marker了，请问还有哪位用过预染marker的，提供点信息，还有哪个公司的预染marker比较好？
顶部
lxh031[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76425
精华 0
积分 335
帖子 389
信誉分 100
可用分 2726
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-5
状态 离线
8

发表于 2013-12-2 16:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

fermentas公司的也可以
顶部
如影随形[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 70421
精华 0
积分 201
帖子 142
信誉分 100
可用分 1466
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-8-10
状态 离线
9

发表于 2013-12-2 16:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我用的promega的不错！
顶部
yayya[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 114491
精华 0
积分 392
帖子 483
信誉分 100
可用分 3138
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-9-25
状态 离线
10

发表于 2013-12-2 16:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我用过genview的预染,只有170块钱,虽然上样5ul有点看不清楚,但上10ul就相当好了,转到PVDF膜上也相当的清楚,呵呵,只是次数较要用的少了一半而已,我觉得还是值得的吧.进口(2000-3000)的一般相对的国产的贵,但上样量少,我觉得算下来还是国产的值得吧
顶部
 23  1/3 123››