小中大经验:如何防止HPLC或CapLC的污染
最小化或者减少背景污染物的建议:所有的溶剂和酸、碱、缓冲盐都是化学品,没有一种是100%纯的。因此,在LC/MS中总是存在着一些化学背景。为了改善数据质量,将干扰以及背景噪音减少到最小是非常值得考虑的。在此我们给大家提出一些小建议,供大家参考。同时也欢迎您也把工作当中的经验和小窍门提供给大家,以便让更多的用户一起分享!
1. 溶剂和添加剂:
a. 使用最高纯度的试剂 – HPLC 级或更高纯度。
i. 最好使用Fisher Optima grade
1. 有些 HPLC 级试剂含有聚乙二醇类(PEG)化合物. 紫外检测器无法检测它们的存在。
2. 有些HPLC级试剂含有铁离子 (Fe+3)
ii. 水可能是污染物的一个主要来源
3. 必须对在线的纯水系统(Milli-Q)进行维护。18 M欧姆的水也不是完全没有有机污染物的。
4. 瓶装水不一定比Milli-Q制得的水更好,因为在瓶装水开启以后,它可能会积聚污染物。
5. 不推荐在塑料容器内储存水。
6. 将水通过一根干净的C18色谱柱以除去有机物质而进一步纯化,这可以通过一个高压二元梯度和一根C18的保护柱而在线进行。
b. 添加剂,例如乙酸可能含有大量的铁。100ppb听起来似乎是很低的浓度,可是,100ppb=100ng/L或者100pg/mL。
i. 乙酸所形成铁的加合物会导致强的ESI+ 质谱图。
ii.甲酸已被证明含有较少的铁离子。
c. 加入最低浓度的添加剂,可以减少化学背景噪音、增加信噪比和灵敏度。
2. 装样品和溶剂的容器
a. 瓶子和盖子,样品提取板:
i. Waters 样品瓶是经过质量控制的, 其他品牌可能没那么洁净。
ii. 带垫片的样品瓶盖,因含有塑胶或者粘合剂,可能会污染自动进样器。
iii. 样品提取板是塑料材质的,可能有增塑剂释出 (例如邻苯二甲酸二辛酯污染物)。
iv. 样品提取板胶合金属箔片的盖子可能会有粘合剂物质流失。
b. 玻璃器皿
i. 用普通的洗涤剂洗涤后,玻璃器皿上可能有洗涤剂残留(聚乙二醇类化合物) 及其它 “粘性的” 物质污染
ii. 应该用即将使用的流动相品质的试剂进行冲洗。
c. 塑料容器或管路:
不要将溶剂或者水储存于塑料的溶器中 (因为其中会如邻苯二甲酸二辛酯污染物)。
3.护手霜
d. 含聚乙二醇类化合物、油脂、维生素等等。
e. 在处理能够接触流动相或者样品的HPLC部件时,请戴手套。
4.样品以及样品基质
f. 样品基质中可能含有盐和其它不期望带入的物质。当制备针头清洗液的时候,必须考虑基质的溶解性。
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