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针对你上面的问题,建议如下:我们做双向电泳有一套标准化程序,所以没试过浓缩胶,低熔点琼脂糖不是很容易凝的,操作熟练不会出现你说的气泡没赶出就凝的现象;重要步骤我们也不用国产试剂,这个是很重要的,你以为用国产试剂省钱,实际上你用国产试剂做失败了,重复多次浪费的钱更多!选择3-10的胶条不是不行,但是这里面有两个问题可以探讨(不是原则):一个是我们做双向电泳的目的是什么?是为了得到有意义的信息,也就是准确可靠的差异点,而并非要胶跑的漂亮,也不是要跑出来的点越多越好。我们常说哪怕你胶跑得再烂,只要你从中找出一个有意义的蛋白,就足够了。另外,我们的经验是3-10 的胶条跑出来的点比较集中,实际上很多点分得不清楚,如果改成4-7的胶条(你这个碱性端的点其实真不多),那么你会发现可能你能得到更多的点,图更加漂亮。之所以建议你用4-7的胶条,其中一个愿意也是从你的角度考虑,你希望得到漂亮的图。转二向,你的条件估计没什么问题,这是常规,但是手法就需要练了。