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标题:【求助】WB曝光曝不出来

雎鸠05[使用道具]
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【求助】WB曝光曝不出来


本人做的一次WB实验,在加入ECL后,各个条带的都很清晰,且亮度也足够,但用胶片曝光一分钟后显影,胶片上却什么都没有。各位大侠能否解释下?
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am10[使用道具]
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曝光时间过短 或许一分钟不够。不知道你说的条带清晰,亮度足够是怎么发现的,个人认为,你的曝光时间是个需要摸索的参数。
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DONT[使用道具]
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在暗室里,我一般是剪4张同样尺寸的胶片,叠在一起,压在膜上方,暗盒一扣,就干别的事情去了。5个小时或过夜,我再把胶片显影,显影我起初很注意技巧,但现在基本上是在显影液里放10分钟,捞出来放到水盘里涮一涮,然后在定影液里放十分钟。我一般总能找到一张理想的胶片,因为胶片叠加到一起后,层层屏蔽,从而逐渐递减荧光强度,我试过多次,即便是荧光强度最强的内参,也至多能达到最上面的第四层胶片。所以显定影后,肯定有曝光过度的胶片,但也肯定有趋势,背景,强度恰到好处的一张,嘿嘿,傻瓜做法。

摘自:穷人的劳斯莱斯-我的五年western blot体会
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abc816[使用道具]
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显影液的问题吧,换新的显影液试试
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mysmdbl[使用道具]
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首先保证你的胶片没有问题!~~~

换个显色剂 定影剂 试一试,

能看到亮的条带的话,压片几十秒就够了,我看不到条带,也是压片几分钟,也就行了

我洗片子,是夹着片子一边洗一边对着灯看,有条带的话就可以定影了,

注意不要显影太长时间,背景就出来了。
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曝光时间过短 或许一分钟不够。不知道你说的条带清晰,亮度足够是怎么发现的,个人认为,你的曝光时间是个需要摸索的参数。

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加入ECL后,可以看见很亮的荧光啊。大家都说亮度大的就不要曝太长时间啊。
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greenbee[使用道具]
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根据个人经验,是显影液的问题。

换新的显影液就解决了。
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qqq111[使用道具]
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曝光后还能看到条带么 如果可以 换新的显影液以及定影液
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QUOTE:
原帖由 greenbee 于 2013-12-5 14:56 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

根据个人经验,是显影液的问题。

换新的显影液就解决了。

但是显影液是新买的啊
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u234[使用道具]
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QUOTE:
原帖由 雎鸠05 于 2013-12-5 14:57 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')


但是显影液是新买的啊

换胶片,柯达
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