【求助】SDS-PAGE出问题，求帮忙。

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标题:【求助】SDS-PAGE出问题，求帮忙。

finger[使用道具]
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发表于 2013-12-6 15:37 资料个人空间短消息加为好友

小中大

最左边是蛋白marker，条带不清楚，而且比说明书上的少了两条条带。右边两个是样品。做胶用的试剂都是新配制的，应该没问题。做了两次都是这样，左右边的样品在跑电泳时候可以看到在点样空里又东西没跑出来。不知道是不是样品的蛋白浓度太大？求高手指点一下，我是菜鸟。

附件

2013-12-6 15:37

61532039.jpg (8.71 KB)

wood533[使用道具]
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发表于 2013-12-6 15:38 资料个人空间短消息加为好友

小中大

你看看你的电泳缓冲液有没有为你，条带都弥散的

831226[使用道具]
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发表于 2013-12-6 15:39 资料个人空间短消息加为好友

小中大

样品煮了后有明显胶体状的东西没

wmp1234[使用道具]
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发表于 2013-12-6 15:39 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我觉得和样品浓度没有关系，还是电泳的问题。1.检查一下电泳缓冲液，必要时重新配置
2.电泳时观察一下电泳仪上显示的电压和电流，是不是电泳仪接触有问题

finger[使用道具]
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发表于 2013-12-6 15:41 资料个人空间短消息加为好友

小中大

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原帖由 831226 于 2013-12-6 15:39 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
样品煮了后有明显胶体状的东西没

是的，样品煮了之后放入-20度冰箱过夜后就变成了凝胶状的了？

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发表于 2013-12-6 15:41 资料个人空间短消息加为好友

小中大

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原帖由 wmp1234 于 2013-12-6 15:39 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

我觉得和样品浓度没有关系，还是电泳的问题。1.检查一下电泳缓冲液，必要时重新配置
2.电泳时观察一下电泳仪上显示的电压和电流，是不是电泳仪接触有问题 ...

电泳仪没问题，我们实验室的其他人也在用，他们的胶跑的很好。我再试试看缓冲液是不是有问题，重新配一下，再跑试试。

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发表于 2013-12-6 15:42 资料个人空间短消息加为好友

小中大

样品太浓

fei1226com[使用道具]
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发表于 2013-12-6 15:42 资料个人空间短消息加为好友

小中大

感觉分离胶聚合不是很好，如果样品过浓，煮过之后离心，点样时取上清；还可以减少上样体积再试试。

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发表于 2013-12-6 15:43 资料个人空间短消息加为好友

小中大

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原帖由 yonger 于 2013-12-6 15:42 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
样品太浓

谢谢了。就是因为样品浓度太高了，稀释了100倍以后条带很好，很清晰。

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发表于 2013-12-6 15:43 资料个人空间短消息加为好友

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原帖由 fei1226com 于 2013-12-6 15:42 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

感觉分离胶聚合不是很好，如果样品过浓，煮过之后离心，点样时取上清；还可以减少上样体积再试试。

谢谢了。是样品浓度太高的原因，问题已解决，但还是谢谢关注。