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标题:【求助】大肠表达系统，高温能表达，低温表达不了？

8princess8[使用道具]
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发表于 2013-12-6 15:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】大肠表达系统，高温能表达，低温表达不了？

大肠表达系统中，为什么有时候只能在高温（30度以上）表达蛋白，但低温就表达不出来了呢？

高温是包涵体的形式

难道是低温表达的蛋白，因为可溶而被大肠降解了？
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wmp1234[使用道具]
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发表于 2013-12-6 15:47 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

同疑问，虽然有多种理由解释，但是没有找到一个文献性的支持。
另外还做过，高温不表达，但是低温可以表达的。
毒性，降解，折叠，还是什么代谢途径~~~
同求帮
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发表于 2013-12-6 15:47 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 wmp1234 于 2013-12-6 15:47 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

同疑问，虽然有多种理由解释，但是没有找到一个文献性的支持。
另外还做过，高温不表达，但是低温可以表达的。
毒性，降解，折叠，还是什么代谢途径~~~
同求帮 ...

哈哈，这个其实得需要各种资源。一般实验室不具备的。

当然也可能和蛋白质本身有关系。
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8princess8[使用道具]
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发表于 2013-12-6 15:48 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 yes4 于 2013-12-6 15:47 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')


哈哈，这个其实得需要各种资源。一般实验室不具备的。

当然也可能和蛋白质本身有关系。

蛋白很个性，和蛋白本身当然是很有关系了。
那么需要什么资源呢？
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8princess8[使用道具]
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发表于 2013-12-6 15:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
有没有解决方案吗？技术手段之类的

听说做几个点突变都可能促进蛋白表达出来
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发表于 2013-12-6 15:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
低温条件下蛋白表达慢，是不是诱导时间太短了？可以用抗体检测下有没有表达，有可能是表达量太低，考马斯亮蓝染色检测不到。
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发表于 2013-12-6 15:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
oomofxw wrote:
蛋白很个性，和蛋白本身当然是很有关系了。
那么需要什么资源呢？

===================================================================

主要是各种不同的宿主菌。可能有的适合表达不同的蛋白质，比如毒性，稀有密码子等。
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发表于 2013-12-6 15:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 yes4 于 2013-12-6 15:50 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
oomofxw wrote:
蛋白很个性，和蛋白本身当然是很有关系了。
那么需要什么资源呢？

===================================================================

主要是各种不同的宿主菌。可能有的适合表达不同的蛋白质，比如 ...

是啊，只是不知道怎么能够预测，减少一下工作量和资源消耗，总不好每一个蛋白都要把宿主菌试一遍，太浪费了……
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yes4[使用道具]
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发表于 2013-12-6 15:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 8princess8 于 2013-12-6 15:51 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')


是啊，只是不知道怎么能够预测，减少一下工作量和资源消耗，总不好每一个蛋白都要把宿主菌试一遍，太浪费了……

任何预测都是一种算法，具体的都得是根据实际情况，有预测可溶性表达的网站，你可以把核苷酸序列给我，我给你看看稀有密码子及疏水情况。
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8princess8[使用道具]
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发表于 2013-12-6 15:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


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原帖由 yes4 于 2013-12-6 15:52 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')


任何预测都是一种算法，具体的都得是根据实际情况，有预测可溶性表达的网站，你可以把核苷酸序列给我，我给你看看稀有密码子及疏水情况。

我把以前做出来的蛋白拿出来分析，测测稀有密码子，算算疏水性。
都不准啊~~~和实验结果很多都对不上
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