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标题:【求助】关于富集磷酸化蛋白的方法

smile_smile[使用道具]
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发表于 2013-12-7 18:41 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】关于富集磷酸化蛋白的方法


目前富集磷酸化蛋白的方法比较多，请XDJM不吝赐教，谈谈各种方法的优缺点！
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leifengta[使用道具]
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发表于 2013-12-7 18:41 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 smile_smile 于 2013-12-7 18:41 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

目前富集磷酸化蛋白的方法比较多，请XDJM不吝赐教，谈谈各种方法的优缺点！

有商业化的试剂盒
你可以关注下
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ROSE李[使用道具]
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 小中大
如不是专门搞分析化学方面的，还是考虑试剂盒吧。
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圆圆圈圈[使用道具]
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发表于 2013-12-7 18:42 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


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原帖由 smile_smile 于 2013-12-7 18:41 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

目前富集磷酸化蛋白的方法比较多，请XDJM不吝赐教，谈谈各种方法的优缺点！

取决于你的实验目的，是要做MS，还是简单的做WB？是做目的磷酸化蛋白的富集还是总磷酸化蛋白的富集？
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quiqui008[使用道具]
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发表于 2013-12-7 18:42 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

比较常用的是铁或镓离子螯和亲和柱吸附，磷酸化的肽也可以。
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smile_smile[使用道具]
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发表于 2013-12-7 18:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


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原帖由 圆圆圈圈 于 2013-12-7 18:42 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')


取决于你的实验目的，是要做MS，还是简单的做WB？是做目的磷酸化蛋白的富集还是总磷酸化蛋白的富集？

对总蛋白进行磷酸化肽段的高通量鉴定，当然鉴定出的磷酸化蛋白要用WB进行confirm。备注：目前在动物中，IMAC和TiO2都常用，但植物中这方法表现不好，这可能也导致了目前植物磷酸化蛋白高通量鉴定的文章不太多。
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owanaka[使用道具]
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发表于 2013-12-7 18:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我们用上海生工磷酸化蛋白或肽提取试剂盒，效果不错。货号是786-255.
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kswl870[使用道具]
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发表于 2013-12-7 18:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

比较常用的TiO2 IMAC 富集
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leifengta[使用道具]
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发表于 2013-12-7 18:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

IMAC富集和TiO2都行 但是IMAC特异性更强，二者的互补性很强，可以参考Journal of protein research上面的很多文章
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