BioMark HD平台应用于CTC单细胞分析

人们通常希望先听到好消息,以帮助应对紧接而来不可避免的坏消息。然而,根据Ozkumur及同事的最新研究,病人很快就可以同时得到阳性及阴性结果。他们开发了一种多步骤的微流控装置,可以分离表面抗原EpCAM(epithelial cell adhesion molecule,上皮细胞粘附分子)阳性或阴性的稀有CTCs(circulating tumor cells,循环肿瘤细胞)。生物通 cuturl('www.ebiotrade.com')
长期以来,血液中发现的EpCAM+细胞定义了典型的CTC。人们已经开发了许多分离技术来计数肿瘤病人血液中的EpCAM+ CTCs;然而,对低EpCAM表达的癌症来说,这些细胞并非总是可以检测到,例如三阴性乳腺癌或黑色素瘤。Ozkumur等设计了一种叫做“CTC-iChip”的自动化平台,通过一系列减瘤、惯性聚焦和磁性分离步骤,可以从临床样本中同时捕获EpCAM+和EpCAM-的癌症细胞。分离到的CTCs然后可以通过标准的临床方法,如免疫细胞化学进行分析。作者使用源自前列腺癌、肺癌、乳腺癌、胰腺癌及结直肠癌病人的全血测试了该装置的“阳性模式”。成功分离到EpCAM+ CTCs后,他们确认了这些细胞是有活性的,且有高质量的RNA可用于分子分析,在一个例子中他们检测了肺癌中的EML4-ALK基因融合。使用该装置的“阴性模式”,作者成功从转移性乳腺癌、胰腺癌及黑色素瘤病人捕获到了EpCAM- CTCs。和来自于病人的原代肿瘤组织相比,这些分离到的CTCs有着相似的外形,说明该微流控装置可以用于临床诊断并同时提供阳性及阴性信息。
Ozkumur等也证明使用iChip分离的CTCs也可以在单细胞水平进行分析。作为一个例子,从一位前列腺癌病人分离到的15个CTCs揭示了间充质及干细胞标志物,以及典型的前列腺癌相关抗原在表达水平上的显著异质性(使用Fluidigm BioMark HD平台)。这种CTC-iChip可以处理大量病人血液来同时获得EpCAM+及EpCAM- CTCs,进而可以更好的揭示病人个体的癌症状态,也使得该装置可以适用于更多的癌症类型。拥有可以进一步分析CTCs分子特征的能力,这种CTC-iChip是对临床中现有诊断工具的一种非常有前景的添加。