液相色谱

最近在做标准氨基酸的测定，是用PITC柱前衍生方法做的，但是做的效果都不好，出来的图谱第三分钟老是会有一个大峰，并且峰的分离效果也不好。各位朋友，如果做过类似实验的能否指点一下？十万火急。谢谢！

这个我做过，不过衍生化试剂和你不一样，22个氨基酸同时衍生同时检测，分离度均为 1.5以上，峰形良好，第三分钟是不是溶剂峰啊

楼主，流动相的选择、流速的设定都会对分离有影响~~可以参考下相关文献

朋友，试一下DNFB吧

我是参考相关文献做的实验，但是做了后感觉真的分离效果不好。是不是PITC衍生剂失效了？

我的QQ306157758，希望能加我，QQ交流问题方便点，谢谢！十万火急啊！

不一定是衍生化试剂问题，3分钟出峰是不可能的，一般5分钟前都是溶剂峰，样品10多分钟出最好

分离不好怎么能归咎于是“衍生”问题呢？色谱条件是什么？进空白，进不加氨基酸衍生的空白，三分钟的那个大包或许能找到出处。

下面是已知的一种条件
流动相A：乙腈，流动相B：50mmolNaAC缓冲溶液（PH=6.5）流速：1ml/min，检测波长：254nm，柱温为40℃。
梯度程序：0min  10%A；
                    5min   10%A；
                    20min   30%A；
                   45min    60%A；
                   50min    95%A；
                   55min    95%A；
                  55.2min  10%A；
                  75min       10%A。

没有氨基酸分析仪吗？

你好，我也想请教一下，我最近在做氨基酸，是DNFB衍生的，20种氨基酸不但没有完全分离，柱子柱效却降低了，可不可以把你的方法说的详细一些呢，我好好向你学习学习。
我最进打算买新柱子的，不过不知道是买通用柱还是买氨基酸分析柱？