蛋白质与蛋白组学 » 讨论区 » 经验共享 » 【求助】ERK1/2蛋白水平及其磷酸化水平的检测

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:【求助】ERK1/2蛋白水平及其磷酸化水平的检测

TAT[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 74236
精华 0
积分 507
帖子 694
信誉分 100
可用分 4298
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-8
状态 离线
1

发表于 2013-12-15 13:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】ERK1/2蛋白水平及其磷酸化水平的检测


大家好，请问有没有朋友做过ERK1/2蛋白水平及其磷酸化水平的检测？一抗买的哪个公司的好？好不好做？谢谢！
顶部
yes4[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77377
精华 0
积分 764
帖子 1145
信誉分 101
可用分 6575
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-16
状态 离线
2

发表于 2013-12-15 13:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
做过
很简单
抗体是CST的
顶部
TAT[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 74236
精华 0
积分 507
帖子 694
信誉分 100
可用分 4298
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-8
状态 离线
3

发表于 2013-12-15 13:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

谢谢！一抗二抗稀释比例是不是1:1000？
顶部
zbboom[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 114497
精华 0
积分 340
帖子 360
信誉分 100
可用分 2600
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-9-25
状态 离线
4

发表于 2013-12-15 13:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 yes4 于 2013-12-15 13:01 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
做过
很简单
抗体是CST的

做过抑制剂对ERK1/2蛋白水平及其磷酸化水平的检测吗。
顶部
yes4[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77377
精华 0
积分 764
帖子 1145
信誉分 101
可用分 6575
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-16
状态 离线
5

发表于 2013-12-15 13:02 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 yes4 于 2013-12-15 13:01 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
做过
很简单
抗体是CST的

没做过呢

只做WB技术服务
具体的科研项目参与很少

你要用什么抑制剂？
顶部
yes4[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77377
精华 0
积分 764
帖子 1145
信誉分 101
可用分 6575
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-16
状态 离线
6

发表于 2013-12-15 13:08 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 TAT 于 2013-12-15 13:01 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

谢谢！一抗二抗稀释比例是不是1:1000？

用1:1000还是1:2000需要通过预实验来确定

不同的ECL对一抗稀释度的要求是不一样的
顶部
dhpbj[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76954
精华 0
积分 270
帖子 280
信誉分 100
可用分 2160
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-11
状态 离线
7

发表于 2013-12-15 13:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 yes4 于 2013-12-15 13:02 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')


没做过呢

只做WB技术服务
具体的科研项目参与很少

你要用什么抑制剂？

用PD98059（erk抑制剂）和SB203580（p38抑制剂），最近在做，但感觉抑制效应很弱，不知道实验步骤哪里出错了，做了很多次，依然没出来，严重耽误了实验的进程，很无奈！
顶部
yes4[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77377
精华 0
积分 764
帖子 1145
信誉分 101
可用分 6575
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-16
状态 离线
8

发表于 2013-12-15 13:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 dhpbj 于 2013-12-15 13:09 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')


用PD98059（erk抑制剂）和SB203580（p38抑制剂），最近在做，但感觉抑制效应很弱，不知道实验步骤哪里出错了，做了很多次，依然没出来，严重耽误了实验的进程，很无奈！ ...

试了不同浓度、时间点的抑制效果吗？

我觉得出现这样的问题很正常
细胞或者说是生物体吧对外来刺激是有不同的抵抗（恢复？）方法的
顶部
ha111[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 72969
精华 0
积分 821
帖子 1239
信誉分 101
可用分 7048
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-9-16
状态 离线
9

发表于 2013-12-15 13:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我们的试验设计如下：
1 预先无血清饥饿（视细胞周期而定）
2 抑制剂作用（一般3h左右，需要不同浓度梯度）
3 刺激因激（如EGF，刺激条件需要预实验摸索）

CST的ERK1/2抗体挺敏感的！
祝你好运！！！
顶部
dhpbj[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76954
精华 0
积分 270
帖子 280
信誉分 100
可用分 2160
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-11
状态 离线
10

发表于 2013-12-15 13:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 ha111 于 2013-12-15 13:10 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

我们的试验设计如下：
1 预先无血清饥饿（视细胞周期而定）
2 抑制剂作用（一般3h左右，需要不同浓度梯度）
3 刺激因激（如EGF，刺激条件需要预实验摸索）

CST的ERK1/2抗体挺敏感的！
祝你好运！！！ ...

谢谢，但第1条，视细胞周期而定是什么意思？无血清饥饿这步很重要吧，平均要饥饿多长时间？
顶部