液相色谱

一般情况，梯度洗脱 有机相的浓度较低，慢慢的随时间延长升高。这样做优点：能很好的把峰给分离开来，特别是极性比较大的峰。但是，这样走一针，花的时间特别长，特别目标峰极性较小时，出峰太晚，如果拿来做含量测定，那太费时了。
       故：如果能用一个比较合适的流动相（先有机相浓度较大，随时间的延长，有机相浓度慢慢降低到合适浓度），这样也能把目标峰分开，且出峰时间大大缩短。这样的话，不知该程序是否可行？不知各位兄台有何高论？小弟坐等。

举例说明吧！
比如我这个样品里面有4个峰，A\B\C\D。按常规流动相0-20%，检测100min。A出峰时间10min，B出峰时间40min，C出峰时间70min,C出峰时间71min。目标峰C

这样的话我想缩短出峰时间、B峰作为杂质尽早出来，但又要把C和D分开（C和D靠得很近），请问怎么选择流动相？

我的思路是，由20%-0，20%能很快把A峰和B峰冲出来，同时，C和D在柱内推进了一段位移，这时浓度已经降到了较低浓度，有充分的机会来把C\D拉开，因为C和D之前有一段位移，所以后面D和C出柱的时间可能就较快。

我的愚见，不知对否！

[ 本帖最后由 把路走绝 于 2010-7-15 11:20 编辑 ]

有机相浓度大，所有峰都出来了啊，分不开了，那就不叫走梯度了，你冲的时候不就是大浓度有机相走吗。你觉得时间长可以把梯度走快一点啊

结合自己样品的特点，可以试试。之前我做过，目标物与杂峰的分离效果不太好！

梯度走快点的话，出峰时间靠后的 目标物与杂质分不开吧！？

我说的这种梯度方法，是否合高效液相梯度的规矩！？

除虫脲和灭幼脲是不是不容易分开哦？

如果一开始有机相浓度较大，所有的就一起出来了。你能分开吗?

朋友，没有什么规矩吧，在不损伤仪器和色谱柱条件下，怎么做都行，只要自己感觉良好就可以了！

提高初始有机相浓度，提高些流速。。。

不太符合。一般都是从低到高的。你如果要是嫌时间长，你可以不梯度设的“陡”一些不就行了。

如果走快点分不开，哪就说明这个梯度不合适，就得调整。梯度一般时间都较长，没办法