蛋白质与蛋白组学 » 讨论区 » 经验共享 » 【求助】兼容MALDI质谱的银染方法

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 12  1/2 12››
 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:【求助】兼容MALDI质谱的银染方法

yjf1026[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76421
精华 1
积分 497
帖子 670
信誉分 102
可用分 4116
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-5
状态 离线
1

发表于 2013-12-18 17:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】兼容MALDI质谱的银染方法


请问有谁有兼容MALDI 质谱的银染方法啊，我最近都是用胶体考染染色，感觉点比较少，好像现在有兼容质谱的银染了，有谁用过吗？可否分享下经验，谢谢噢~~~
顶部
utt0989[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 78340
精华 1
积分 660
帖子 975
信誉分 102
可用分 5663
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-28
状态 离线
2

发表于 2013-12-18 17:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #1 yjf1026 的帖子

看不懂你说的意思，大概可以说下银染出来的胶体对质谱如MALDI来说影响很小的，而且不用脱色即可消化然后鉴定，但一般来讲银染灵敏度高，所以染出来的样品一般含量少，丰都低，不利于鉴定，一般情况一级还可以鉴定出来，二级（TOF/TOF)就很难打出漂亮的峰图来,上扬两大的话无论银染还是考然都会打出很好的峰图的
顶部
2541[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 75124
精华 0
积分 742
帖子 1144
信誉分 100
可用分 6580
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-19
状态 离线
3

发表于 2013-12-18 17:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

考染上样量加大到银染的5倍左右，做出来的效果也会挺好的，和银染不相上下
顶部
2541[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 75124
精华 0
积分 742
帖子 1144
信誉分 100
可用分 6580
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-19
状态 离线
4

发表于 2013-12-18 17:15 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
小区域内考染和银染比较效果图！


查看积分策略说明
附件
2013-12-18 17:15
29115635.jpg (36.94 KB)
 
顶部
gogo[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77052
精华 0
积分 821
帖子 1341
信誉分 100
可用分 7487
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-12
状态 离线
5

发表于 2013-12-18 17:15 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
相关疾病：
头痛
你可以用银染做分析胶
进质谱 在做一份制备胶（考染）就好！
不过感觉银染重复性不太好，可能步骤太多，很多试剂要现配，批次之间难免存在误差！
最近就遇到了这个头痛的问题！
顶部
yjf1026[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76421
精华 1
积分 497
帖子 670
信誉分 102
可用分 4116
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-5
状态 离线
6

发表于 2013-12-18 17:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

这两天也考虑了银染重复性的问题，想想还是从别的地方找原因吧，呵呵
顶部
2541[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 75124
精华 0
积分 742
帖子 1144
信誉分 100
可用分 6580
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-19
状态 离线
7

发表于 2013-12-18 17:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
个人还是觉得直接用考染分析，用考染鉴定，银染确实比较麻烦，而且点太多的话，不一定利于分析，因为图谱就这么大，太多了会影响分析的！考染做的好的话，分辨率比银染差不了多少!
顶部
one[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 73393
精华 0
积分 697
帖子 1114
信誉分 100
可用分 6353
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-9-22
状态 离线
8

发表于 2013-12-18 17:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

Bio-rad 有一个银染试剂盒就可以与质谱测序兼容。
顶部
pengke1983[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 78619
精华 0
积分 470
帖子 639
信誉分 100
可用分 3986
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-1
状态 离线
9

发表于 2013-12-18 17:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

30-50ul 30mM K3Fe(CN)6:100mM Na2S203=1:1(V/V)加入胶块内，洗脱至蛋白质棕色消失，去除上清，立刻加200ul水终止反应，10min后，去除上清，再加入100ul 100mM NH4HCO3，静置20Min 去除上清。
顶部
yjf1026[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76421
精华 1
积分 497
帖子 670
信誉分 102
可用分 4116
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-5
状态 离线
10

发表于 2013-12-18 17:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


是没有影响，不过操作复杂，重复性不很好，而且打点成功率视乎比较低，呵呵~~SO~~
顶部
 12  1/2 12››