【求助】2-DE：为什么同样的条件跑出不一样的图？

蛋白质与蛋白组学 » 讨论区 » 经验共享 » 【求助】2-DE：为什么同样的条件跑出不一样的图？

15 1/2 1 2 ››

需要登录并加入本群才可以回复和发新贴

打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:【求助】2-DE：为什么同样的条件跑出不一样的图？

dongdongqiang[使用道具]
三级
Rank: 3

UID 79825
精华 1
积分 473
帖子 601
信誉分 102
可用分 3821
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-12-16
状态离线

发表于 2013-12-19 15:52 资料个人空间短消息加为好友

小中大

相关疾病：
宫颈癌
宫颈癌组织为什么同样的条件跑出不一样的图？从蛋白提取到电泳全是一起做的，为何差别这么大？也做过蛋白浓度测定的。

dongdongqiang[使用道具]
三级
Rank: 3

UID 79825
精华 1
积分 473
帖子 601
信誉分 102
可用分 3821
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-12-16
状态离线

发表于 2013-12-19 15:53 资料个人空间短消息加为好友

小中大

相关疾病：
宫颈癌
宫颈癌组织为什么同样的条件跑出不一样的图？从蛋白提取到电泳全是一起做的，为何差别这么大？也做过蛋白浓度测定的。好像图没发上去。重新复制到WORD上发送。

dongdongqiang[使用道具]
三级
Rank: 3

UID 79825
精华 1
积分 473
帖子 601
信誉分 102
可用分 3821
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-12-16
状态离线

发表于 2013-12-19 15:53 资料个人空间短消息加为好友

小中大

宫颈癌组织为什么同样的条件跑出不一样的图？从蛋白提取到电泳全是一起做的，为何差别这么大？也做过蛋白浓度测定的.不好意思，把图片格式改为JPG,再发一次。

附件

2013-12-19 15:53

47252312.snap.jpg (20.14 KB)

dongdongqiang[使用道具]
三级
Rank: 3

UID 79825
精华 1
积分 473
帖子 601
信誉分 102
可用分 3821
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-12-16
状态离线

发表于 2013-12-19 15:55 资料个人空间短消息加为好友

小中大

第二张

附件

2013-12-19 15:55

14015355.snap.jpg (21.53 KB)

ha111[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 72969
精华 0
积分 821
帖子 1239
信誉分 101
可用分 7048
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-9-16
状态离线

发表于 2013-12-19 15:55 资料个人空间短消息加为好友

小中大

从上面的信息是很难回答什么啊。
你的这两个样品有没有进行过1D电泳？跑完后用考马斯亮蓝染色看看，是不是样品在制备的过程中出现了这么大的差别？
还有就是胶条有没有问题？
就这么一次的结果是这样子的吗？重复了没有啊？呵呵，2D电泳的步骤比较多，由于操作的原因可能你自己还没有意识到。
2D的重复性不好，但也没有离谱到这个程度啊。

dongdongqiang[使用道具]
三级
Rank: 3

UID 79825
精华 1
积分 473
帖子 601
信誉分 102
可用分 3821
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-12-16
状态离线

发表于 2013-12-19 15:56 资料个人空间短消息加为好友

小中大

用的考染，样品制备同时做的。上一次同样步骤两幅图略有差异，可惜胶碎了，没拍成像，此次不同处在于放胶条时先用反灌法加了少许琼脂糖，不过两根胶条是一样做的呀！会不会是放置第一根胶条时反复去除气泡，第二根胶条在室温下放太久了？（吸干平衡液后大概10分钟）。

tuuu2[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 77597
精华 0
积分 507
帖子 674
信誉分 100
可用分 4211
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-18
状态离线

发表于 2013-12-19 15:56 资料个人空间短消息加为好友

小中大

第二份样品的制备过程出了问题
虽然是同时做的但从图中来看的话第二份样品质量明显有问题

dongdongqiang[使用道具]
三级
Rank: 3

UID 79825
精华 1
积分 473
帖子 601
信誉分 102
可用分 3821
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-12-16
状态离线