蛋白质与蛋白组学 » 讨论区 » 经验共享 » 【求助】我的 2D图，真是怕什么来什么

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 16  1/2 12››
 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:【求助】我的 2D图，真是怕什么来什么

30moonriver[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 108873
精华 0
积分 296
帖子 252
信誉分 100
可用分 2097
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-5-15
状态 离线
1

发表于 2013-12-21 14:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】我的 2D图，真是怕什么来什么


做双向之前听说常遇见的问题就是电压上不去，横竖条纹多，以前做的时候偶尔电压上不去，可是这次连横竖条纹也出来了，请各位大侠前辈们帮忙分析一下知道一下吧，
18cm pH3-10L，上样量4mg（我觉得上样量太大了，请问胶体考染合适的上样量是多少？？），一向的时候8000V是聚焦的最后才升上去的，二向2W 1h，17W 3h
请大家帮忙看看吧，谢谢！！


查看积分策略说明
附件
2013-12-21 14:54
87777960.jpg (31.39 KB)
 
顶部
ROSE李[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76171
精华 0
积分 466
帖子 611
信誉分 100
可用分 3866
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-2
状态 离线
2

发表于 2013-12-21 14:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我们17cm的上样1mg左右考染的，你的太大了吧。横纵纹，猜是上样量大导致的杂质增多的缘故吧。我的凝胶也有这种现象，不知道怎么解决。郁闷ing。。。
顶部
30moonriver[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 108873
精华 0
积分 296
帖子 252
信誉分 100
可用分 2097
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-5-15
状态 离线
3

发表于 2013-12-21 14:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 ROSE李 于 2013-12-21 14:54 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

我们17cm的上样1mg左右考染的，你的太大了吧。横纵纹，猜是上样量大导致的杂质增多的缘故吧。我的凝胶也有这种现象，不知道怎么解决。郁闷ing。。。 ...

看来我的上样量真的是太太大了，哎，，下次改正！谢谢！
顶部
uaubc[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 107981
精华 0
积分 451
帖子 562
信誉分 100
可用分 3661
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-4-27
状态 离线
4

发表于 2013-12-21 14:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

看了上面老师的讨论，学生想请教一个问题，我想做二维电泳的实验，但是因为起初不知道，标本取好以后没有用ＰＢＳ液冲洗，没有去除表面的血液，这样血液中高丰度的蛋白质会在胶上将会掩盖有意的蛋白质点。。。现在标本保存在液氮中，不知道怎样处理才能去除这些血液成分？？？？因为都已经冻在一起了。。。。十分焦急，谢谢帮助。。。
顶部
30moonriver[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 108873
精华 0
积分 296
帖子 252
信誉分 100
可用分 2097
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-5-15
状态 离线
5

发表于 2013-12-21 14:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 uaubc 于 2013-12-21 14:55 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

看了上面老师的讨论，学生想请教一个问题，我想做二维电泳的实验，但是因为起初不知道，标本取好以后没有用ＰＢＳ液冲洗，没有去除表面的血液，这样血液中高丰度的蛋白质会在胶上将会掩盖有意的蛋白质点。。。现在标本保存在液氮中，不 ...

抱歉 我是做植物 对动物的不清楚 你可以发个新帖子问问其他前辈！
顶部
8s5g[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 77636
精华 0
积分 469
帖子 538
信誉分 100
可用分 3626
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-19
状态 离线
6

发表于 2013-12-21 14:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
样品杂质比较多吧。。
纵条纹可能是核酸的原因
横条纹其实还好。。
顶部
30moonriver[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 108873
精华 0
积分 296
帖子 252
信誉分 100
可用分 2097
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-5-15
状态 离线
7

发表于 2013-12-21 14:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 8s5g 于 2013-12-21 14:56 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
样品杂质比较多吧。。
纵条纹可能是核酸的原因
横条纹其实还好。。

同样的方法制备蛋白样品，以前都很好，这次就成这样了。。。
顶部
66+77[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 75637
精华 1
积分 596
帖子 785
信誉分 103
可用分 4751
专家分 20
阅读权限 255
注册 2011-10-26
状态 离线
8

发表于 2013-12-21 14:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我的银染200ug 全是横条纹 郁闷 不知道什么原因 老板在催 而且有毕业的压力
顶部
30moonriver[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 108873
精华 0
积分 296
帖子 252
信誉分 100
可用分 2097
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-5-15
状态 离线
9

发表于 2013-12-21 14:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 66+77 于 2013-12-21 14:57 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

我的银染200ug 全是横条纹 郁闷 不知道什么原因 老板在催 而且有毕业的压力

这是我做的第一次出现横条纹，以前都没有，你再处理一下样品
顶部
9900[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 75149
精华 0
积分 399
帖子 478
信誉分 100
可用分 3216
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-19
状态 离线
10

发表于 2013-12-21 14:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

ph3-10NL 24cm 10000V 80000V.H
请大家多提宝贵意见，急。。。。


查看积分策略说明
附件
2013-12-21 14:57
78792396.jpg (71.35 KB)
 
顶部
 16  1/2 12››