【求助】我的胶条应不应该换成pH3-10 NL？

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标题:【求助】我的胶条应不应该换成pH3-10 NL？

鸽子不哭[使用道具]
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发表于 2013-12-23 17:33 资料个人空间短消息加为好友

小中大

现在做的都是用24cm，pH3-10线性胶条，不知道用pH3-10 NL会有改善吗？

附件

2013-12-23 17:33

97984760.snap.jpg (18.28 KB)

鸽子不哭[使用道具]
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发表于 2013-12-23 17:33 资料个人空间短消息加为好友

小中大

又或者是24cm，pH4-7的呢？

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发表于 2013-12-23 17:34 资料个人空间短消息加为好友

小中大

这样已经很好了
非线性胶条不会有太大改善了

66+77[使用道具]
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发表于 2013-12-23 17:34 资料个人空间短消息加为好友

小中大

从图中看，点基本都分开了，并没有出现中间区域点分布开的情况，所以个人认为没必要用NL的去做，但是图24的胶条看LZ的图点好像太少了点，如果样品本身表达蛋白少的话个人认为算不错了，不然的话感觉在样品制备上还需改进

鸽子不哭[使用道具]
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发表于 2013-12-23 17:35 资料个人空间短消息加为好友

小中大

谢谢大家积极回应！
第一张图是HT1080 cell的，
再发几张小鼠组织的2D图，
请大家帮忙分析一下：
1. 为什么碱性区的spots都不是很多？
2. 在pH4-5的区域好像有点挤，如果用24cm，pH4-7 胶条是不是分布的会好些？反正pH7以后的点都不多，pH3-10NL的好像也是说可以提高4-7的分辨率
3. 我做的细胞和组织的样品处理方法都差不多，都用了2D clear up kit，出来的点好像都确实不是很多，可能有些损失，但不知道怎么再提高了
4. pH4-7 和pH3-10 的范围的胶条，聚焦的电压和时间可以一样吗？

附件

2013-12-23 17:35

49827265.snap.jpg (17.04 KB)