蛋白质与蛋白组学 » 讨论区 » 经验共享 » 【求助】蛋白质能用HPLC C18柱或C8柱分离吗？

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:【求助】蛋白质能用HPLC C18柱或C8柱分离吗？

11_hjx[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 114486
精华 0
积分 249
帖子 197
信誉分 100
可用分 1782
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-9-25
状态 离线
1

发表于 2014-1-9 11:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】蛋白质能用HPLC C18柱或C8柱分离吗？


我从植物种子中提取粗蛋白，经Sephadex G100分离后得三个峰，选其中一个峰经DEAE-FF纯化后，得四个峰,PAGE显示他们分子量在14.4-20kDa。我想分别检测这四个峰的纯度，请问能用HPLC反相C18柱吗分离吗？C8呢，哪个好些。实验室只有这两种柱了！
谢谢！谢谢!
顶部
qianqin1977[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 75849
精华 0
积分 370
帖子 460
信誉分 100
可用分 3076
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-28
状态 离线
2

发表于 2014-1-9 11:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #1 11_hjx 的帖子

当然可以，你可以先尝试C18，一般来说，蛋白质的疏水性不会非常的强，用较高保留的柱子分离度更好
顶部
11_hjx[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 114486
精华 0
积分 249
帖子 197
信誉分 100
可用分 1782
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-9-25
状态 离线
3

发表于 2014-1-9 11:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 qianqin1977 于 2014-1-9 11:50 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
当然可以，你可以先尝试C18，一般来说，蛋白质的疏水性不会非常的强，用较高保留的柱子分离度更好

以前听说蛋白质分子量太大，可能会堵塞柱子。
顶部
qianqin1977[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 75849
精华 0
积分 370
帖子 460
信誉分 100
可用分 3076
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-28
状态 离线
4

发表于 2014-1-9 11:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #3 11_hjx 的帖子

要用大孔柱子，比如说Agilent的300SB-C18，不能用小孔径的SB-C18
顶部
8s5g[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 77636
精华 0
积分 469
帖子 538
信誉分 100
可用分 3626
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-19
状态 离线
5

发表于 2014-1-9 11:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我的柱子是
Agilent TC C-18，5um,4.6*250mm,
请问该柱子能分离14.4-20kDa的蛋白质吗？谢谢各位高手！
顶部
了了[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 73224
精华 0
积分 367
帖子 453
信誉分 100
可用分 3031
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-9-20
状态 离线
6

发表于 2014-1-9 11:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
可以的，取少量样品试试就知道了。
顶部
11_hjx[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 114486
精华 0
积分 249
帖子 197
信誉分 100
可用分 1782
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-9-25
状态 离线
7

发表于 2014-1-9 11:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
有没有人用过Viva C18色谱柱，粒径 5um,孔径 300A.
这个分离蛋白效果如何？谢谢各位！！
顶部
969[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 74241
精华 0
积分 429
帖子 518
信誉分 100
可用分 3441
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-8
状态 离线
8

发表于 2014-1-9 11:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

理论上C越多分离效果越好，所以C18应该比C8要好。做HPLC还要摸索检测条件比较麻烦
其实你分子量不小，使用PAGE电泳使用软件分析纯度应该不会偏差很多
顶部
了了[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 73224
精华 0
积分 367
帖子 453
信誉分 100
可用分 3031
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-9-20
状态 离线
9

发表于 2014-1-9 11:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

你这么大分子量的蛋白，用C8更合适。条件不难摸索。
顶部