【求助】SDS－ＰＡＧＥ上样样品上漂

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标题:【求助】SDS－ＰＡＧＥ上样样品上漂

vcve[使用道具]
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发表于 2014-1-9 15:52 资料个人空间短消息加为好友

小中大

跑电泳时遇到一个很奇怪的问题，上样时，所有的样品除了ｍａｒｋｅｒ外均有上漂的现象，几乎都跑出了上样孔。蛋白样品中不含有机溶剂，同样的样品以前也做过，没有出现过类似情况，是否有可能是上样缓冲液过期了（好像保质期是１年吧，我用的缓冲早过了一年了，不过大概半个月前用时还没有出现异常）？另外这次电泳缓冲液是师弟配的，问他SDS加了多少，他也记不清了，是否电泳缓冲液中SDS加多了也会出现样品上漂的状况呢？

pengke1983[使用道具]
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发表于 2014-1-9 15:53 资料个人空间短消息加为好友

小中大

有没有可能你的正负极接反了，我有一次碰到过类似的情况，但是没有仔细观察MARKER有没有上漂。

vcve[使用道具]
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发表于 2014-1-9 15:54 资料个人空间短消息加为好友

小中大

回复 #2 pengke1983 的帖子

不是，还没开始接电源，上样时就发生了上漂现象

is2011[使用道具]
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发表于 2014-1-9 15:54 资料个人空间短消息加为好友

小中大

样本的上漂和缓冲液的质量有关，我们一般在蛋白的变性时加入buffer，里面含有甘油成分，可以在水中是蛋白一起下沉到加样孔的底部！你的问题估计就是出在buffer上，那个buffer不贵，自己再买一只就可以了。好像碧云天是买一送一的质量可以，我原来就是用的碧云天的。
祝你好运！

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发表于 2014-1-9 15:55 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 is2011 于 2014-1-9 15:54 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

样本的上漂和缓冲液的质量有关，我们一般在蛋白的变性时加入buffer，里面含有甘油成分，可以在水中是蛋白一起下沉到加样孔的底部！你的问题估计就是出在buffer上，那个buffer不贵，自己再买一只就可以了。好像碧云天是买一送一 ...

同意，上样缓冲液中甘油的浓度偏低了。不过这个上样缓冲液自己配制就可以了，很简单的，按分子克隆上的配方做。

vcve[使用道具]
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发表于 2014-1-9 15:55 资料个人空间短消息加为好友

小中大

谢谢！我用的就是碧云天的上样buffer，已经用了一年多了，大概半个月前用还是好的，这次就……

summerxx[使用道具]
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发表于 2014-1-9 15:55 资料个人空间短消息加为好友

小中大

上样缓冲液一年没问题的，我们用的也一年多了，没事，可能是配制的时候出问题了吧

u234[使用道具]
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