蛋白质与蛋白组学 » 讨论区 » 经验共享 » 【求助】PARP WB检测的问题

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:【求助】PARP WB检测的问题

uaubc[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 107981
精华 0
积分 451
帖子 562
信誉分 100
可用分 3661
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-4-27
状态 离线
1

发表于 2014-1-9 17:48 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】PARP WB检测的问题


我之前在做细胞凋亡PARP检测的时候发现，内参蛋白GAPDH表达一致的情况下，PARP 89KD的剪切片段表达量越大，其原形态表达量也越大，请问这正常吗？
另外还想请教，凋亡检测阳性对照用什么药物比较好啊？最好具体点，谢谢指教~
顶部
remenb[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 75236
精华 0
积分 631
帖子 941
信誉分 100
可用分 5531
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-20
状态 离线
2

发表于 2014-1-9 17:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我认为不正常。
凋亡细胞阳性对照可以用VCR，请问你用的是什莫细胞株？如果是AML 如EOL-1 细胞，5nM 24 h /48 h 后提蛋白。
顶部
uaubc[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 107981
精华 0
积分 451
帖子 562
信誉分 100
可用分 3661
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-4-27
状态 离线
3

发表于 2014-1-9 17:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
谢谢楼上的
我搜索了一下其它的帖子，有人跟我遇到了相同的问题，但是没有人答复。还请各位有经验的人来解释下。
我用的是H1299细胞系，是大细胞肺癌的。
有么有这种可能：由于干扰使得细胞pre-PARP表达量增加，同时被caspase3剪切的量也增加了？
顶部
star#room[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76306
精华 0
积分 421
帖子 501
信誉分 100
可用分 3361
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-3
状态 离线
4

发表于 2014-1-9 17:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

相关疾病：
肺癌
请楼主注意，H1299是人肺腺癌细胞系，不是大细胞肺癌。
顶部
eric930[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 79368
精华 0
积分 722
帖子 1061
信誉分 101
可用分 6148
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-12-10
状态 离线
5

发表于 2014-1-9 17:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

相关疾病：
肺癌
请楼主注意，H1299是人肺腺癌细胞系，不是大细胞肺癌。
顶部
standbyme[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 75190
精华 1
积分 365
帖子 405
信誉分 102
可用分 2821
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-10-20
状态 离线
6

发表于 2014-1-9 17:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

相关疾病：
肺癌
请楼主注意，H1299是人肺腺癌细胞系，不是大细胞肺癌。
顶部
uaubc[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 107981
精华 0
积分 451
帖子 562
信誉分 100
可用分 3661
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-4-27
状态 离线
7

发表于 2014-1-9 17:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

相关疾病：
腺癌
H1299是大细胞肺癌而不是腺癌。如果不信的话可以把H1299致瘤的切片看一下。
顶部
youyou99[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 75216
精华 0
积分 583
帖子 765
信誉分 100
可用分 4756
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-20
状态 离线
8

发表于 2014-1-9 17:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

关注此贴，如果检测炎症疾病时的表达。是否也同战友没研究的凋亡一样，原形态表达量和剪切片段表达量都较正常对照组更高？
到底是用PAR（代表PARP活性）的抗体还是用PARP抗体？
求解答~谢谢
顶部
jkobn[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 75366
精华 0
积分 468
帖子 574
信誉分 101
可用分 3711
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-10-22
状态 离线
9

发表于 2014-1-9 17:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
请问你用的是那个公司的PARP抗体？效果好吗？
顶部
uaubc[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 107981
精华 0
积分 451
帖子 562
信誉分 100
可用分 3661
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-4-27
状态 离线
10

发表于 2014-1-9 17:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我用的是cst公司的抗体。效果可以。目前没有发现更合理的解释了。只能沿着自己的路子摸索了，做实验就是如此。呵呵。
顶部