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第一，我漏说了金属螯合层析填料要选用那些臂比较长的
请教有商品化的介质吗，还是要自己做胶？能否给个名称，我也买点来试试。
第二，建议的洗脱方式是pH梯度，不是咪唑
是pH梯度还是分段pH？我感觉除了HPLC这样的精确系统外，梯度洗脱方式不适合实验室操作。原因有二：一是纯化设备，并不是很多实验室都有AKTA之类的好设备（虽然我有几台）；二是自装柱达不到很高的均匀性，特别是用国产的空柱。所以做实验时拉梯度所得到的结果往往不能重复和放大。
第三，我们公司目前做的一个蛋白用proteinA纯化的，长时间放置后活性损失较大，但也不是说所有的都这样，只是作为一个提示
这个我不认为是纯化的原因。应该是保存条件和缓冲体系的选择因素。
第四，我没有否认A/G的优点特异性好，快捷，方便，但是其缺点包括有失活可能，价格高，不适合所有抗体，时间长，载量小，而且目前耐碱的proteinA似乎只有一种，如何保证除热源？配基脱落也是一个问题。
是啊，A/G太贵，sure介质简直就是天价。还好我纯化的蛋白对热源没有要求，但IMAC可以用NaOH清洗吗？或者说能用NaOH清洗的IMAC介质价格也不便宜吧，那些预挂Ni的IMAC介质能用多少次而载量下降不大？自己挂Ni？好想法，翻遍user manua，好，还真的有，那就做吧，咦，怎么和新介质性质不一样了？NaOH不耐了，DTT也不耐了，哇哦，原来再生方法是商业秘密。
不适合所有抗体，yes，IgM它就无能为力。
载量小，我不大同意。A/G在实际纯化过程中的载量大约在15mg/ml左右，IMAC和蛋白种类关系很大，但绝大多数在20mg/ml左右，相差不是太大。再考虑到吸附动力学的因素，A/G对抗体的吸附牢固都高于IMAC吧，所以我认为IMAC并不能提供高于A/G多少的载量。
第五，价格高，有其生产成本的因素，而且处于近乎垄断地位的商品有什么具体的定价标准，GE的东西都贵，买的人不还是多？
国产胶也有好东东，垄断正在逐步打破，价格比GE要便宜很多。做纯化的人非常高兴看到有和GE产品品质媲美的国产介质出现。
