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我是这样做的,膜用tbs-t洗涤好后,加入碧云天ecl plus发光液a,b液各1ml混匀,放置于保鲜膜上,然后把膜在ddH2O中浸泡漂洗几秒钟后,将水滴下少许,放置于前面做好的ecl plus液中,约1min,正反两面都浸泡(当中翻转膜一次),放置在另一张保险膜上,为了让膜上残留的ecl液体可以去掉点,这里没有用吸水纸吸,然后用保鲜膜包裹(有可能保险膜太大,所以我把边上多余部分包在膜上面,)放置在片夹中,进暗示曝光,曝光时间不长,最多2min,放入显影液中,显影液之前用过一次,效果比这次好多了,水中漂洗,然后定影。pcna同样方法做,不同的是,那张膜是最后浸泡ecl液。恳请各位大哥不吝刺激,万分感谢。