【求助】Mark在压缩胶就分开了，请问是怎么回事？

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标题:【求助】Mark在压缩胶就分开了，请问是怎么回事？

qqq111[使用道具]
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发表于 2014-1-16 20:18 资料个人空间短消息加为好友

小中大

请教各位前辈，mark在压缩胶就分开了，不知道原因。以前做也有过这样的状况，但用同样的东西再做一次就好了，所以我也没有深究。现在我换成1.0mm(以前是1.5mm)的板，连续做了两次都是一样的状况。第一次出现这种情况的时候我第一反应就是胶配错了，昨天又配的时候我反复确认了，也重新测了Tris的PH值，确认没错。
具体是这样的，mark一进入压缩胶就分开了，而且有点儿向两侧的孔中散开倾斜，蛋白也没压成一条线，有一定的宽度，很弥散，在分离胶中还是会继续分。跑完电泳后我用考马G250染了色，蛋白还是可以分开的，看得出条带，可是最明显的一条（我认为是beta-actin)并不在mark指示43kd的位置，而且mark的条带数比应该有的多，倒数第二条居然有条绿色的，而这条在没染考马之前被溴芬兰挡到了看不出。
请各位帮忙分析一下，这是为什么呢？

remenb[使用道具]
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发表于 2014-1-17 15:47 资料个人空间短消息加为好友

小中大

重新配过你所有的试剂，可能长菌了什么的，改变了成分。

ending[使用道具]
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发表于 2014-1-17 15:48 资料个人空间短消息加为好友

小中大

这块胶是不是已经跑过了，有次我做了两块胶，一块没有上样，一起跑了，再用来跑就发现marker在积层胶就分开了

qqq111[使用道具]
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发表于 2014-1-17 15:51 资料个人空间短消息加为好友

小中大

没有啊，新配的胶，而且试剂也是新配不久的~如果找不到原因的话只能再全部重新配过了~不过还是谢谢两位前辈指点~

NBA[使用道具]
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发表于 2014-1-17 15:51 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 qqq111 于 2014-1-16 20:18 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

请教各位前辈，mark在压缩胶就分开了，不知道原因。以前做也有过这样的状况，但用同样的东西再做一次就好了，所以我也没有深究。现在我换成1.0mm(以前是1.5mm)的板，连续做了两次都是一样的状况。第一次出现这种情况的时候我 ...

浓缩胶高度多少？

qqq111[使用道具]
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发表于 2014-1-17 15:52 资料个人空间短消息加为好友

小中大