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河豚毒素检测——河豚毒素毒力检测法

关键词：国家标准物质信息平台  生物成分分析标准物质  农药标准物质  无机标准样品
1．试剂
①甲醇。
②10％醋酸。
③无水乙醚。
  2．检测步骤
  取5 g定性样品处理残渣于圆底烧瓶中，加甲醇50 mL，用10％醋酸调pH为4～5，蒸馏20 min，离心，收集上清液于锥形瓶中，重复一次，合并上清液，水浴蒸除甲醇，移人蒸发皿中，水浴蒸发，呈浆液状，用无水乙醚20 mL×3，分3次洗涤除去脂肪浓缩液于10 mL比色管中，水定容至刻度，煮沸5 min灭菌，过滤，用灭菌水稀释成各种浓度，选择小白鼠若干只，每组3只，每只小白鼠腹腔注射灭菌稀释液0．5 mL，选择在15～30 min内死亡的小白鼠作为判断毒力的标准。
    3．计算
    河豚毒素(M．U．)=V*S*M/m*V1
    式中：V——检液体积，mL；
    S——小白鼠体重，g；
    M——最小致死量的检液稀释倍数；
    m——样品质量，g；
    V1——给小白鼠的剂量，mL；
    M．U．——河豚毒素毒力单位。
    4．结果判断
    ①小白鼠未发生死亡，此样品为80M．U．以下，即<80M．U．。
    ②如用检液1／200稀释液注射小白鼠腹腔内，在5～30 min内死亡，则样品为12 000M．U．。
    ③如果为300～400M．U．以下也有小白鼠死亡，可认为非河豚毒素中毒死亡。
    5．说明
    ①河豚毒素的毒力是用样品1 g毒死小白鼠的g数为单位，以M．U．表示。
②供试小白鼠，应从专一实验动物实验室选购，其体重为15～20 g。

[ 本帖最后由 rmhot 于 2014-1-30 22:33 编辑 ]