【求助】IgG过柱纯化

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标题:【求助】IgG过柱纯化

00无名指00[使用道具]
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发表于 2014-2-3 22:38 资料个人空间短消息加为好友

小中大

各位老师好，请教一个问题，我想纯化IgG,然后免疫动物，已经用饱和硫酸铵粗提过了，想请教一下用什么柱子提纯比较好？最好不要太贵，谢谢了

wiwi[使用道具]
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发表于 2014-2-3 22:38 资料个人空间短消息加为好友

小中大

小量几十ml的话，用protein A或protein G就可以
疏水柱也可以纯化
大量的话，上百ml，建议使用streamline protein A
之前根据载量估计一下需要的柱子体积

douding66[使用道具]
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发表于 2014-2-3 22:38 资料个人空间短消息加为好友

小中大

不应该看样品体积,而是看样品里面IgG的总量
不知道你的是什么种类的IgG,如果是羊和大鼠的IgG那推荐proteinG
其他的推荐proteinA填料
一般1ml proteinA对于IgG的载量在15-35mg/ml
所以你自己看吧,有多少IgG需要纯化就买多少proteinA的填料
没必要买streamline系列的,那个系列价格高,而且很多功能你并不需要

00无名指00[使用道具]
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发表于 2014-2-3 22:39 资料个人空间短消息加为好友

小中大

谢谢各位老师的帮助，我查过，ProteinA需要5000元呢，肯定是不能买吧，我用过DEAE-32柱子，但是胀不起来，不知道怎么办，有没有别的柱子？实验条件有限，谢谢啊

douding66[使用道具]
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发表于 2014-2-3 22:39 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 00无名指00 于 2014-2-3 22:39 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
谢谢各位老师的帮助，我查过，ProteinA需要5000元呢，肯定是不能买吧，我用过DEAE-32柱子，但是胀不起来，不知道怎么办，有没有别的柱子？实验条件有限，谢谢啊 ...

5000元是5ml的价格吧?
你可以买1ml的呀,而且1ml的价格也没那么贵,基本在8,900的样子

douding66[使用道具]
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发表于 2014-2-3 22:40 资料个人空间短消息加为好友

小中大

如果实在没钱买填料,那就继续硫酸铵沉淀吧,做的好也可以大于70%左右的纯度,呵呵

00无名指00[使用道具]
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发表于 2014-2-3 22:40 资料个人空间短消息加为好友

小中大

各位老师，哪个地方可以查到购买ProteinA的信息，哪个公司的比较好？我刚接触，不是很明白，谢谢老师，我的蛋白样品含量是1.5mg/ml，大约有20ml能用1ml的纯化么？谢谢

douding66[使用道具]
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