蛋白质与蛋白组学 » 讨论区 » 经验共享 » 【求助】蛋白溶液中含有色素怎么办？

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 11  1/2 12››
 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:【求助】蛋白溶液中含有色素怎么办？

bananapeople[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 75315
精华 1
积分 492
帖子 620
信誉分 102
可用分 3964
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-10-21
状态 离线
1

发表于 2014-2-3 23:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】蛋白溶液中含有色素怎么办？


最近做了一个试验，结果在提取的蛋白溶液中含有血色素，整个溶液呈现茶红色，请教各位高手，怎样才能把液体中这些色素去除掉呢？谢谢
顶部
bananapeople[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 75315
精华 1
积分 492
帖子 620
信誉分 102
可用分 3964
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-10-21
状态 离线
2

发表于 2014-2-3 23:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

透析法或者吸附法是佛普可行呢？
顶部
guagua[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 72040
精华 2
积分 732
帖子 1016
信誉分 104
可用分 5955
专家分 20
阅读权限 255
注册 2011-9-3
状态 离线
3

发表于 2014-2-3 23:05 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
尝试一下，透析，沉淀
如果是过常规柱纯化，过滤后直接上柱，色素影响不大，可以被洗掉。
顶部
bananapeople[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 75315
精华 1
积分 492
帖子 620
信誉分 102
可用分 3964
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-10-21
状态 离线
4

发表于 2014-2-3 23:05 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
不过我们的目的不是纯化蛋白而是尽可能多的保留不同分子量的小分子蛋白，只是对蛋白溶液的颜色和蛋白浓度有要求。透析的话可以除去溶液的色素吗？
顶部
guagua[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 72040
精华 2
积分 732
帖子 1016
信誉分 104
可用分 5955
专家分 20
阅读权限 255
注册 2011-9-3
状态 离线
5

发表于 2014-2-3 23:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
色素可能是血红蛋白中的血红素　血红蛋白的每个亚基由一条肽链和一个血红素分子构成，肽链在生理条件下会盘绕折叠成球形，把血红素分子包在里面，血红素分子是一个具有卟啉结构的小分子。
所以你要保留所有蛋白，必然会有颜色。
根据结构看，除非你把血红蛋白变性，肽链打开，把血红色释放出来，否则透析也没有用，因为是蛋白在显颜色。
我没做过血液蛋白，以上只是理论推测，共同讨论一下。
顶部
bananapeople[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 75315
精华 1
积分 492
帖子 620
信誉分 102
可用分 3964
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-10-21
状态 离线
6

发表于 2014-2-3 23:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 guagua 于 2014-2-3 23:06 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
色素可能是血红蛋白中的血红素　血红蛋白的每个亚基由一条肽链和一个血红素分子构成，肽链在生理条件下会盘绕折叠成球形，把血红素分子包在里面，血红素分子是一个具有卟啉结构的小分子。
所以你要保留所有蛋白，必然会有颜 ...

你说的很有道理，不过我们的蛋白溶液是经过0.22um滤膜过滤以后还存在于溶液中的，也就是说，溶液中是不可能含有血红蛋白的了，气颜色是有血红蛋白溶血、破碎以后释放于蛋白溶液中的，我也猜想用透析的方法，只是不知道是否可行，感觉可能还是没法除去溶液中存在的血红素，如果用活性炭吸附的话，估计是可以除去的，可是同时蛋白也会被吸附而降低溶液中蛋白的浓度，达不到我们的要求。所以希望各位高手指点一下，有没有什么好一点的办法，既不会降低溶液中蛋白的浓度，又可以把溶液中存在的血红素除去。如果血红素是已经从蛋白中释放出来的，那么用透析的方法可以除去溶液中存在的血红素吗？
顶部
bananapeople[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 75315
精华 1
积分 492
帖子 620
信誉分 102
可用分 3964
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-10-21
状态 离线
7

发表于 2014-2-3 23:07 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

你提到的沉淀法，是指蛋白盐析吗？不同分子量的小分子蛋白盐析能行吗？
顶部
guagua[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 72040
精华 2
积分 732
帖子 1016
信誉分 104
可用分 5955
专家分 20
阅读权限 255
注册 2011-9-3
状态 离线
8

发表于 2014-2-3 23:07 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

盐析是和蛋白疏水结构有关的。
根据我做真菌蛋白的经验，盐析不能完全除掉色素。
顶部
bananapeople[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 75315
精华 1
积分 492
帖子 620
信誉分 102
可用分 3964
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-10-21
状态 离线
9

发表于 2014-2-3 23:08 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

哦，这样的啊，那就是说只能通过透析的方法和超滤的方法来去除了啊，但是超滤法会在超滤的时候使蛋白产生较大的损失，透析的话是否也会存在同样的问题啊？
顶部
bananapeople[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 75315
精华 1
积分 492
帖子 620
信誉分 102
可用分 3964
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-10-21
状态 离线
10

发表于 2014-2-3 23:08 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

今天去找老板商量，吸附法和透析法全被老板给毙了，一个怕蛋白同时也被吸附没了，一个说是成本太高。哎，看来只能走超滤这条路了。
顶部
 11  1/2 12››