【求助】western 确定目的条带？

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标题:【求助】western 确定目的条带？

hulu呼噜[使用道具]
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发表于 2014-2-3 23:09 资料个人空间短消息加为好友

小中大

小弟我初做western blot 实验,做cyclin d1,fas,条带不止一根，背景布太好，老板建议我剪下目的条带，但是遇到一个实际问题，如何根据分子量确定我的目标条带，我做的是ecl曝光的，在底片上如何根据分子量大小确定目标条带。我看到有的底片边上好像确实有marker，小弟我很想知道如何将marker也曝光到底片上去，请哪位做过的师兄不吝赐教，谢谢。

panda王[使用道具]
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发表于 2014-2-3 23:10 资料个人空间短消息加为好友

小中大

有可以曝光在胶片上的marker产品
你检索下本版看看。

@STAR@[使用道具]
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发表于 2014-2-3 23:10 资料个人空间短消息加为好友

小中大

将marker也曝光到底片上去？
这个我没做过，而且现在我做WB不需要底片啊，我现在是直接膜上加ECL显色液，直接成象系统下面照相就可以了，结果也不错啊。底片什么的还是麻烦。。
其次，你的意思我理解，无非是想确定目的蛋白的位置，这个你在转完膜之后用立春红染下在膜上作好标记就知道了啊。根据marker的条带确定你目的蛋白的位置，然后剪下来再下一步，这样最方便。
至于你想的把marker也曝光到底片上去，由于1抗不跟你的marker结合，所以他不会跟你的目的蛋白一起显色的，而且marker是多种蛋白的混合体，想靠ECL显色法使之同时显色是不可能的。
综上述，楼Z实验顺利。。。

fangxiang[使用道具]
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发表于 2014-2-3 23:10 资料个人空间短消息加为好友

小中大

现在有Western blot marker
可以和任何抗体结合
在ECL的时候可以曝光出Marker的条带
可以上网站搜索
祝你好运
我正在用

hulu呼噜[使用道具]
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发表于 2014-2-3 23:11 资料个人空间短消息加为好友

小中大

谢谢各位指导?你将在转完膜之后用立春红染下在膜上作好标记就知道了啊.那样的话,那张膜还可以继续后续实验吗?

kuaizige[使用道具]
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