现代分析实验

我目前在做薄层层析，自己铺的板，规格是50×200，用的是青岛海洋化工的硅胶GF254.我做的实验是在二甲基亚砜和叔戊醇的混合溶剂中，用脂肪酶催化蔗糖与脂肪酸合成蔗糖酯。展开剂是甲苯:乙酸乙酯：甲醇：水=10:5:4.5:0.2。把反应液直接点到板上，跑完层析，用薄层扫描仪254nm下观察，除原点，外跑出一个点，溶剂前沿还有一片阴影。跑出那个点，经证实居然是脂肪酶上掉下来的不明物质，也就是说并没有找到我要的产物的点，之后我又用食品加工所使用的蔗糖酯用氯仿配成50g/L的溶液，点板，上样量3μL，除原点外一个点未跑出。求高人指点薄层层析要点，及我的实验出现此种状况的原因。

神啊，你的展开剂那么复杂啊，没见过呢。小板先确定好比例再去爬大板。还有就是你可以把你的体系处理一下，用有机溶剂萃取，用水洗掉DMSO和醇，以免影响你判断。

首先，你的蔗糖和脂肪酸有荧光，还有断裂的碎片，疑问？其次蔗糖在酸性条件下水解，不知道你的这个会不会是蔗糖分解……

非常感谢，那随便两种溶剂，一种极性强些，一种弱些，调解比例就行么？有什么讲究么？我是在文献中中看到这个展开剂的，我也不知道为什么他这样配制，但是好多人都采取了他这个展开剂。还有就是用这种带荧光的板，在245nm光下观察会不会有看不到的物质？

您的答案对我非常有帮助，是因为蔗糖和脂肪酸都有荧光，所以我用薄层扫描仪在254nm下看不见么？那蔗糖酯也有荧光么？断裂的碎片是什么？请您多指教，谢谢

我的意思是你的蔗糖和脂肪酸没有荧光，酯也没有，碎片就是你说的从蔗糖上掉下来的不明物质，还有你的蔗糖扫描仪不是紫外？

这个你用DMSO作为溶剂，那肯定是会出现这样的情况的，一般DMF也会出现这样的情况。把DMSO换掉就OK

是紫外啊，我的板是有荧光的，脂肪酸和蔗糖没荧光，那应该能看见啊

脂肪酸和蔗糖看不见荧光，你在紫外下根本没法鉴别，没法看……