生物制药

在凝胶法检测细菌内毒素限值的实验中，鲎试剂的灵敏度该如何选择

什么时候该选择0.03EU/ml 什么时候选择0.125EU/ml 以及0.5EU/ml 的？



新手求解答，谢谢

根据细菌内毒素限值的实验中，各个灵敏度的鲎试剂均需考察的，经考察无干扰，你想选择那种就那种。其中还有考虑药品的最大有效浓度或最小稀释倍数。

某注射剂药品浓度为0.6mg/ml的，限制是0.05EU/ml,鲎试剂为什么要用用0.03EU/ml的？

最小稀释倍数这个药品里有给出吗？

我放错地方了嘛，怎么都没人。。。。

细菌内毒素检查法（凝胶法）实验程序如下：



一、实验准备：试剂、仪器、及用具等



二、确定药品的细菌内毒素限值（L）



三、计算供试品的最大有效稀释倍数（MVD）或最低有效浓度（MVC）



四、鲎试剂灵敏度复核



五、药品与鲎试剂相容性的初筛试验



六、供试品干扰试验以及干扰试验的验证



七、供试品日常的内毒素限量检查。



对于有关鲎试剂法进行内毒素检测的，欢迎与我联系。上传个细菌内毒素检查法的PPT,希望对大家有所帮助。

MVD（最大有效稀释倍数）= [(内毒素限值)(供试品溶液浓度)]/λ



在这里:



L (内毒素限值)= K/M



供试品溶液浓度 =单位浓度/ml



λ = 凝胶法的标示灵敏度或标准曲线上的最低点浓度



L为产品中“允许”的内毒素水平



K = 以 EU/Kg 为单位的阈热原剂量



M =每小时每公斤体重的最大人体剂量



如果限值用 EU/ml表示，供试品溶液浓度是 1 ml/ml



*****MVD不是单位…是一个稀释倍数*****

鲎试剂灵敏度主要是根据你所需检测样品的内毒素限值进行确定，选择等于或低于该限值灵敏度的鲎试剂；进行内毒素检测时，选择高于限值灵敏度的鲎试剂你如何保证你的样品的内毒素含量低于限值呢？

如楼主举例某注射剂药品限值是0.05EU/ml，又因为鲎试剂灵敏度一般只有0.03EU/ml、0.06EU/ml、0.125EU/ml、0.25EU/ml、0.5EU/ml、1EU/ml等，部分厂家如厦门鲎试剂实验厂还可以提供灵敏度为0.015EU/ml和2EU/ml的凝胶法鲎试剂，因而，你只能选择灵敏度为0.03EU/ml和0.015EU/ml的鲎试剂，只不过这时你要对样品进行一定程度的稀释。

但如果你要选择灵敏度数值高的鲎试剂，如0.125EU/ml 或0.5EU/ml 的，进行内毒素检测，你最终只能确定你的样品内毒素含量是低于0.125EU/ml 或0.5EU/ml ，不能保证它的等于或低于0.05EU/ml。

想请问一个问题，在进行细菌内毒素检查时，我的供试液浓度需要含2λ内毒素吗？也就是说如果我的供试液浓度是0.5EU/ml，我可以选择灵敏度为0.5的鲎试剂吗？因为我觉得我加0.1ml0.5的供试液到0.1ml鲎试剂中，供试液的浓度被稀释成了0.25，感觉该选0.25的鲎试剂，谢谢你再给我解答一下，非常感谢