小中大一般做WESTERN用预染的MARKER跑胶,转膜后膜上可以看到MARKER条带.因为你用ECL发光的时候利用的是抗体上HRP这个只能催化有相应蛋白的地方出现条带,MARKER一般都是用鸡,等禽类动物的蛋白,不可能与抗体相结合,所以不会出现条带,如果MARKER能暴出条带说明你做的实验不可信.
对比MARKER的方法有很多,
1:暴光后直接把底片和膜比对,MARKER会映在底片上,前提是底片上有膜的边缘.
2:用发光标尺作为定位器,可以标出底片放置的位子,发光标尺有卖的,自己搜一下.很好用,几十块钱可以用10年.
3,用发光MARKER 价格偏贵.
4:现在有一种活体成像仪很方便,不用X光底片 直接拿膜照相,即可以照ECL发的光,也可以照自然光.这样MARKER就可以照到,再拼到一起比对MARKER.我们就在用这个仪器,感觉很好。还省了底片的钱.
注意:以上操作的统一要求,暴光后不要移动膜的位子,比对完MARKER后再拿出膜.
