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标题:【求助】western blot 一定要无菌操作吗?

remonte[使用道具]
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【求助】western blot 一定要无菌操作吗?


做western blot 一定要无菌操作吗?我是个新手,请各位多指教。谢谢!
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wmp1234[使用道具]
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回复 #1 remonte 的帖子

不用,但是要戴手套,以防蛋白污染
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panda王[使用道具]
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原帖由 wmp1234 于 2014-2-15 10:28 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
不用,但是要戴手套,以防蛋白污染

缓冲液中有甲醇,也不适合 没有任何保护措施的操作。
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831226[使用道具]
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事实上,也没有办法做到无菌操作,总不至于将膜什么都高压一下,整个过程在超净台里做吧.当然个人的防护必不可少,如楼上所说,甲醇是有毒的,
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am10[使用道具]
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完全没必要,也不可能做到。
转膜后不要再用手动膜了,可以不带手套,用镊子就行了。
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wmp1234[使用道具]
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收集的标本难道不要无菌吗?
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yes4[使用道具]
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有些文献写提取蛋白需要无菌操作,以防标本污染?是这样的吗?我是产科的研究生,阴道分娩的胎盘肯定不如剖宫产来的无菌,一直犹豫阴道分娩的胎盘能否采集?
请各位多指教。谢谢!
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panda王[使用道具]
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QUOTE:
原帖由 yes4 于 2014-2-15 10:34 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

有些文献写提取蛋白需要无菌操作,以防标本污染?是这样的吗?我是产科的研究生,阴道分娩的胎盘肯定不如剖宫产来的无菌,一直犹豫阴道分娩的胎盘能否采集?
请各位多指教。谢谢! ...

不过你这里说的无菌操作,我不知道您是指试验操作中的无菌还是样本处理中的无菌。
可能某些标本取材后,需要立即提取蛋白或者简单处理,分装后,放入负80的低温冰箱保存着。如果保存不当的话,可能会导致样本中某些的蛋白的降解或者受到污染。
如果是实验操作的话,除了试剂成分中需要注意的,其它的地方基本上都无需做到无菌操作。
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我是指标本需要无菌吗?(收集的胎盘标本要无菌吗?胎盘提取蛋白过程要无菌吗?)我是取胎盘后立即放置液氮灌中,在转移至负80度的冰箱。应该不存在保存不当。我想收集20个标本在一起做实验。谢谢指教!
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ero11[使用道具]
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QUOTE:
原帖由 yes4 于 2014-2-15 10:35 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

我是指标本需要无菌吗?(收集的胎盘标本要无菌吗?胎盘提取蛋白过程要无菌吗?)我是取胎盘后立即放置液氮灌中,在转移至负80度的冰箱。应该不存在保存不当。我想收集20个标本在一起做实验。谢谢指教! ...

提取组织的蛋白是不需要无菌的。
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