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标题:【求助】gs115电转不成功

S6044[使用道具]
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发表于 2014-2-15 17:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】gs115电转不成功


我做了几次gs115电转,都不成功.之前在X33能电转成功.
我想知道gs115是不是要进行组氨酸缺陷的筛选?
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fei1226com[使用道具]
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发表于 2014-2-15 17:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

GS115是进行组氨酸缺陷筛选，电转后的菌体涂布MD板
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S6044[使用道具]
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发表于 2014-2-15 17:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
谢谢
我涂YPDS板不成功.
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S6044[使用道具]
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发表于 2014-2-15 17:34 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我的菌种是别人挑的单克隆.是不是没有组氨酸缺陷?为什么要有组氨酸缺陷才生长?
YPDS板听说不用加组氨酸
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gogo[使用道具]
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发表于 2014-2-15 17:35 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

GS115是组氨酸缺陷，要加组氨酸的！
转化对照做了吗？
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发表于 2014-2-15 17:35 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
谢谢!
组氨酸是加在MD平板还是YPDS平板上?
没做对照.
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jujuba[使用道具]
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发表于 2014-2-15 17:35 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

MD板上加了组氨酸就没有筛选的效果了，GS115本身是组氨酸缺陷型的，而我们所先用的质粒上要含有组氨酸的基因，这样只有构建好的质粒有转进GS115的菌株才可以在MD板上生长，也就是所要的阳性克隆
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jujuba[使用道具]
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发表于 2014-2-15 17:36 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

配制MD板时要选用agar A（不含有组氨酸）
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101010[使用道具]
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发表于 2014-2-15 17:36 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我用MD板,结果第二天长得密密麻麻的,不知道是不是没用agar A?
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49888[使用道具]
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发表于 2014-2-15 17:36 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 101010 于 2014-2-15 17:36 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
我用MD板,结果第二天长得密密麻麻的,不知道是不是没用agar A?

呵呵，可以先做个检测就是，确定是重组子了再做表达！
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