【求助】请问western blot 对分泌性蛋白敏感吗??

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标题:【求助】请问western blot 对分泌性蛋白敏感吗??

fox_79[使用道具]
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发表于 2014-2-19 17:35 资料个人空间短消息加为好友

小中大

各位老师学长:
请问western blot 对分泌性蛋白敏感吗??是不是不容易做,做的时候和普通蛋白有什么区别啊?谢谢指教!!

eve_49[使用道具]
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发表于 2014-2-19 17:39 资料个人空间短消息加为好友

小中大

请问western blot 对分泌性蛋白敏感吗??是不是不容易做,做的时候和普通蛋白有什么区别啊?谢谢指教!!
western blot 利用抗原抗体反应来检测蛋白表达：
分泌性蛋白是指分泌到细胞培养基上清中的蛋白，如果你的分泌性蛋白表达微弱；那末你最好浓缩培养基上清，使分泌蛋白浓度升高。如果蛋白表达量很高，即使不浓缩也能检测到。你说的普通蛋白是不是指细胞内的蛋白，细胞内的蛋白检测，需要破碎细胞，不同细胞组分中蛋白有不同的提取方法。我也不知道你是如何做的？你最好详细描述。

wmp1234[使用道具]
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发表于 2014-2-19 17:58 资料个人空间短消息加为好友

小中大

分泌到培养基中的蛋白最好用ELISA或者RIA分析，WB很难做出来。

fox_79[使用道具]
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发表于 2014-2-19 17:59 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我做的是脑组织,以前做的蛋白是细胞浆蛋白,现在做的是分泌性蛋白,表达量不高,用western blot 做了几次都没有做出来啊

fox_79[使用道具]
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