蛋白质与蛋白组学 » 讨论区 » 经验共享 » 【求助】SDS电泳条带倾斜

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:【求助】SDS电泳条带倾斜

yyaxw84[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 114481
精华 0
积分 307
帖子 334
信誉分 100
可用分 2444
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-9-25
状态 离线
1

发表于 2014-3-10 21:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】SDS电泳条带倾斜


大家好！ 我想请教一个问题，我在做蛋白的SDS-PAGE电泳，发现与Marker相邻孔的蛋白条带总是倾斜，不知道是怎么回事？其他的条带都没有问题。样品缓冲液中没有加巯基乙醇，但稀释Marker的缓冲液中含巯基乙醇，我想是不是这个原因，请高手指点！谢谢！电泳图见附件


查看积分策略说明
附件
2014-3-10 21:03
34650123.jpg (53.49 KB)
 
顶部
birdfish[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 74196
精华 1
积分 539
帖子 654
信誉分 102
可用分 4196
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-10-8
状态 离线
2

发表于 2014-3-10 21:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

有可能是这原因,有些蛋白还原电泳和非还原电泳跑出来大小可能会有微小的差异
顶部
yyaxw84[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 114481
精华 0
积分 307
帖子 334
信誉分 100
可用分 2444
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-9-25
状态 离线
3

发表于 2014-3-10 21:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

谢谢！那我该怎么做才行？
如果在样品和marker之间隔一孔不加样，不知道还会不会出现这个问题。
另外，如果我将marker也用不含巯基乙醇的缓冲液稀释，不知道marker能不能跑出来条带，不知道有人是否这样试过。
请各位大侠帮我支招，多谢~！
顶部
seagate[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 114508
精华 0
积分 601
帖子 922
信誉分 100
可用分 5343
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-9-25
状态 离线
4

发表于 2014-3-10 21:05 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

marker跑的慢吗　感觉是marker干扰了相邻的道
加一个其他的marker比较　别相邻
顶部
yyaxw84[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 114481
精华 0
积分 307
帖子 334
信誉分 100
可用分 2444
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-9-25
状态 离线
5

发表于 2014-3-10 21:05 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

marker跑得不慢， 和样品 一样的速度
那我将marker和样品之间空一个孔，不知道是不是相互之间就不受影响了
恳请大家多提宝贵意见！谢谢！
顶部
yyaxw84[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 114481
精华 0
积分 307
帖子 334
信誉分 100
可用分 2444
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-9-25
状态 离线
6

发表于 2014-3-10 21:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

大家好! 敬请高手帮忙分析上面的电泳图 ,谢谢能提出合适的解决方案!
有经验的高手快回复,不胜感激!
顶部
喵咪[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 71749
精华 0
积分 338
帖子 455
信誉分 100
可用分 2961
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-8-30
状态 离线
7

发表于 2014-3-10 21:07 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

buffer的问题可能性最大！
样品的跟Marker的不是一样的，产生了干扰。
另外，蛋白浓度太高也会出现这种情况，减少上样量，或者把样品稀释一下。
顶部
yyaxw84[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 114481
精华 0
积分 307
帖子 334
信誉分 100
可用分 2444
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-9-25
状态 离线
8

发表于 2014-3-10 21:07 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我还想问一个问题，就是凝胶最边上孔的条带为什么总是 向上倾斜，就是 呈微笑状，是不是 边缘效应 ，应该 怎么 改变才可避免，谢谢提出宝贵的意见 ！
顶部
喵咪[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 71749
精华 0
积分 338
帖子 455
信誉分 100
可用分 2961
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-8-30
状态 离线
9

发表于 2014-3-10 21:07 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

是边缘效应，边上的换成loading好了。
顶部
yyaxw84[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 114481
精华 0
积分 307
帖子 334
信誉分 100
可用分 2444
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-9-25
状态 离线
10

发表于 2014-3-10 21:08 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

loading是不是样品缓冲液呀，如果边缘什么都不加也可以吧
顶部