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这样的情况不多，一般不会一点也转不过去的。
【1】转移的时候有放冰袋或者冰降温吗？如果没有，转移完后，转移液应该是有比较明显的温度升高，即使放了冰袋或者冰，转完后电转液的温度也会有一定的升高（可以用手摸一下转移液，很容易摸出是否有温度的升高），如果转完后没有温度升高（和初始的转移液温度相同），说明根本就没有有效的转移。可能是转移槽的盖子没盖紧，电源没接上，转移槽支架上的金属丝断了，或者某个地方的电线接触不好。请注意这一点，感觉转移完成后，转移液的温度并没有升高的可能性比较大，如果这样，转不过去的原因就如上述。感觉问题在此点的可能性比较大。
【2】电转液（转移液）是怎么配制的？我用的是如下配方，尽管配方并不都是相同的，但应该还是差不多的，看一下，是不是电转液有问题。
转移缓冲液（48mmol/L Tris，39mmol/L甘氨酸，0.037％ SDS，20％甲醇）
甘氨酸（MW75.07） 2.9g
Tris（MW121.14） 5.8g
SDS 0.37g
甲醇 200ml
蒸馏水至 1000ml
溶解后室温保存，次溶液可重复使用3～5次。
上面是1×的，配制时可以配成10×的，然后应用时再稀释成1×的。
【3】转膜一般还是用衡流好一些，所以最好不要用衡压，而用衡流。
【4】即使胶和膜的位置放反了，或者夹膜的夹子黑面和白面放反了，胶上的蛋白也会转走的，转不到膜上，也会转到其他地方的，而不会在胶上的。
