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今天第一次做western,自认为每步都做得比较规范,但最后底片洗出后就是没 有图象.不知道问题出在什么地方.
1转膜丽春红染色后,条带比较明显。丽春红染色后能不能再做免疫反应呢？
【1】丽春红染色肯定对后面的结果有影响，如果染两次之后如果染膜效果好，就不要再染了。可以多上样两个孔，转膜完了之后，把这两个孔的膜剪下来，然后丽春红染色。
2一抗孵育是不是要过夜，我今天是在室温下2小时孵育的。另外，用过的一抗能不能重复使用啊？
【1】的确有的一抗可以反复应用很多次的，有的用几次就不好用了。主要跟抗体的特性、质量等有关，跟储存等情况也有关。所以，一种一抗稀释液用多长时间，一般只有用了才知道。
【2】当然用一次也可以的，我就是用一次。每次的用量是400微升～1毫升。效果也是很好的。我就是用塑料袋做成小袋子，然后把膜放到里面，然后把一抗稀释液放到里面。然后用封膜机把口封上。这样一抗稀释液就可以把膜全包上了。
【3】一抗过夜当然可以。我是37度在摇床上90分钟，效果也挺好的。
