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标题:【求助】转膜时怎么赶出气泡?

birdfish[使用道具]
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发表于 2014-3-13 17:42 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】转膜时怎么赶出气泡?


western已经做了两个星期了，这两天做的时候老是在转膜时出现气泡，导致目的条带没全部转到膜上，很郁闷。我做的方法和以前一样（湿转），先在滤纸上放胶，再把膜盖上，用玻璃棒轻轻赶出气泡，确定没气泡后放上滤纸和海绵，合上夹子。但是转膜完后，用丽春红染色能很明显看到有气泡存在，我百思不得其解，希望各位多多指教！
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ROSE李[使用道具]
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发表于 2014-3-13 17:42 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

一点建议：
铺好滤纸之后在其上加一些转膜液，轻轻从一边开始铺胶。
以下步骤如此，
最后再赶气泡，应该能够解决。
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XYZQ[使用道具]
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发表于 2014-3-13 17:42 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

找个小的槽，将膜、滤纸、胶、海绵、夹子统统浸没在电转液中。在水下操作，产生气泡的可能性就很小了。
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zwsyrt[使用道具]
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发表于 2014-3-13 17:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

找一干净的小盘，专门转膜用，倒入转膜液，将NC膜浸入水中，湿转。我是将海绵-滤纸-胶-膜-滤纸-海绵排好后，左手压着海绵的一端（赶气泡过程中不活动），用50ml离心管盛一些转膜缓冲液倒在海绵的上方，借助水的压力减少空隙，然后用离心管按上下左右的方向压海绵赶气泡，反复3-5次，合上夹子（注：液面能漫过夹子），效果不错，未出现过气泡干扰现象。
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ffaa[使用道具]
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发表于 2014-3-13 17:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

每放一层，倒适量转膜液汁后，再放下一层，先贴一端，慢慢放下直到完全贴上，整个贴完之后用玻璃棒赶气泡
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birdfish[使用道具]
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发表于 2014-3-13 17:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

谢谢各位的指教。我今天又做了一次，还是有气泡，还好没有影响目的条带的位置。我做的时候也请别的同学看了，他确认说没气泡我才合上夹子，但结果为什么还是这样，郁闷中......
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eric930[使用道具]
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发表于 2014-3-13 17:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

3.03 g TRIS
14.4 g Gly
200ml CH3OH
定容到1000ml
没有气泡的转移缓冲液
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