液相色谱

前几天由于感冒等原因，做完液相冲完柱子后没有卸柱子（安捷伦HC- C18，250mm）。实验室的其他人就用错了柱子，用我的走了一夜的中药（三七提取物，流动性为乙腈和水）。我发现后让他们停了（因为我的是做单体的柱子），用乙腈冲了二个小时。但是，后来发现我的柱子用纯甲醇现在压力就138bar（以前是65bar）.我后来用分别用纯乙腈冲了2h，用95的水也冲了6h，还是不行！我后来问安捷伦工程师，他让我用纯甲醇（1ml/min）反冲30min-1h。我现在想知道，这样行不？大家有没有更好的建议？我的是新柱子啊，用了不到一个月！并且我肯定液相管道等没问题，用别的柱子试过了！我后悔死了

用纯甲醇（1ml/min）反冲30min-1h是可以的！

可以的，可能是他们用的东西堵住了柱子，反冲将其冲出来！

只能反冲了，反冲都不行，抠掉柱头。但是柱效会受影响。

反冲可以试试，出口端别接检测器

时间不要太长

中药是柱子杀手

千万不要反冲，我们老师做了几十年药分了，他说过，柱子反冲就是柱子不想要了，中药毁柱子是相当强悍了，最快的跑一星期中药柱子就差不多了，小流速冲着，问问他用的什么缓冲液，要是磷酸的话千万不能用有机溶剂，否则柱子就毁了，不是磷酸的话可以用纯甲醇，我建议先用10%甲醇小流速（0。 2-0.5）冲4-5小时，然后甲醇小流速冲2小时

反冲肯定是下策。。。

但有时候没办法，死马当活马医了

其实有些柱子可以反着用好久了

个人建议不要反冲。色谱柱的方向就是色谱柱装填的方向，如果反冲之后就会造成填料疏密程度改变，从而改变峰型，分离度等。建议看看色谱柱说明书中的再生条件。当然如果楼主抱着死马当活马医的态度，反冲也未尝不可。还有建议楼主的朋友如果是中药分析一定要加保护柱，而且要用专业中药分析柱。已经有每周换一根色谱柱的例子了。

看来大家都认为反冲不好，可是现在有没有更好的解决办法没？我现在指望这个柱子毕业啊  

既然工程师说了就没问题，你的就是柱子堵了，而且我觉得堵得也不是很严重。有的柱子是不能反冲的，但是多数柱子都是可以的，既然工程师说了，你还怕什么？