蛋白质与蛋白组学 » 讨论区 » 经验共享 » 【求助】底物显色液的配制

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 16  1/2 12››
 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:【求助】底物显色液的配制

DDD[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 73222
精华 1
积分 587
帖子 790
信誉分 102
可用分 4768
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-9-20
状态 离线
1

发表于 2014-3-17 15:19 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】底物显色液的配制


请教各位战友：
我初次做Western Blot ，配制底物显色液的配方是：DAB 4mg，30%的双氧水 15uL，0.01M Tris-cl(pH7.5) 5mL。但是放置了一天，DAB 也没有溶解，请问各位有什么好的方法可以让它溶解呀？ 还有就是我用的双氧水已经买了一年了，会不会已经失效了，所以DAB 才不溶解的，它应该在使用之前加还是在配制显色液时就可以加上?
另外，配好的底物显色液应该保存在多少度下使用时间可以长一些呀？
先谢谢各位了！
顶部
redbutterfly[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76433
精华 0
积分 701
帖子 1102
信誉分 100
可用分 6281
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-5
状态 离线
2

发表于 2014-3-17 15:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

很多试剂公司可以买 DAB 显色kit，价钱不贵，很方便使用。
你可以看看，国产的挺多。
顶部
DDD[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 73222
精华 1
积分 587
帖子 790
信誉分 102
可用分 4768
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-9-20
状态 离线
3

发表于 2014-3-17 15:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我们已经买了粉末状的DAB，如果不用就浪费了，自己配制DAB显色液就没有很好的溶解办法吗？我看园子里以前也有问这个问题的，但是也是没有好的回答。
顶部
ending[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76092
精华 0
积分 771
帖子 1242
信誉分 100
可用分 6981
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-1
状态 离线
4

发表于 2014-3-17 15:21 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

考虑一下，浪费钱还是浪费时间，哪个更合算?
我认为你买的粉末状的DAB有问题。
顶部
lxh031[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76425
精华 0
积分 335
帖子 389
信誉分 100
可用分 2726
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-5
状态 离线
5

发表于 2014-3-17 15:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 DDD 于 2014-3-17 15:19 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

请教各位战友：
我初次做Western Blot ，配制底物显色液的配方是：DAB 4mg，30%的双氧水 15uL，0.01M Tris-cl(pH7.5) 5mL。但是放置了一天，DAB 也没有溶解，请问各位有什么好的方法可以让它溶解呀？ 还有就是我用的双氧水已经买了 ...

我没有做过DAB显色，但是从原理来讲，DAB是酶反应的底物，二抗上耦联的酶是催化剂（加速反应），双氧水是反应的供氢体。
因此双氧水和底物必须分开放置，否则即使没有酶参与催化，也有可能缓慢反应。同时说明双氧水对DAB溶解是没有影响的。
其次双氧水放一年是没有问题的，一瓶500ml，每次反应就几个ul，你想能用多久？
顶部
DONT[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 73548
精华 0
积分 449
帖子 557
信誉分 100
可用分 3626
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-9-24
状态 离线
6

发表于 2014-3-17 15:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 ending 于 2014-3-17 15:21 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

考虑一下，浪费钱还是浪费时间，哪个更合算?
我认为你买的粉末状的DAB有问题。

我们的DAB是从欣经科买的，一直保存在-20度，应该没有问题的。
俺当然是不想浪费钱也不想浪费时间喽！
再也没有给俺回复的了吗？
顶部
DONT[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 73548
精华 0
积分 449
帖子 557
信誉分 100
可用分 3626
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-9-24
状态 离线
7

发表于 2014-3-17 15:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

直接问技术支持，有时这招最管用
顶部
xyw5[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 75137
精华 1
积分 620
帖子 815
信誉分 102
可用分 4991
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-10-19
状态 离线
8

发表于 2014-3-17 15:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
请教各位战友：
我初次做Western Blot ，配制底物显色液的配方是：DAB 4mg，30%的双氧水 15uL，0.01M Tris-cl(pH7.5) 5mL。但是放置了一天，DAB 也没有溶解，请问各位有什么好的方法可以让它溶解呀？ 还有就是我用的双氧水已经买了一年了，会不会已经失效了，所以DAB 才不溶解的，它应该在使用之前加还是在配制显色液时就可以加上?
另外，配好的底物显色液应该保存在多少度下使用时间可以长一些呀？
先谢谢各位了！
......

====================================

自己配不合算，买现成的底物显色液也便宜
顶部
panda王[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 72140
精华 0
积分 852
帖子 1444
信誉分 100
可用分 7919
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-9-5
状态 离线
9

发表于 2014-3-17 15:26 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 DONT 于 2014-3-17 15:24 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

直接问技术支持，有时这招最管用

技术支持不一定啥都懂。呵呵
当然这个电话要打的，说不定态度好，退回去，换成显色kit也不是不可以。。。 呵呵
顶部
panda王[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 72140
精华 0
积分 852
帖子 1444
信誉分 100
可用分 7919
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-9-5
状态 离线
10

发表于 2014-3-17 15:26 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 DONT 于 2014-3-17 15:23 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')


我们的DAB是从欣经科买的，一直保存在-20度，应该没有问题的。
俺当然是不想浪费钱也不想浪费时间喽！
再也没有给俺回复的了吗？

对于试验中出现的问题，去寻求答案是一个好事情，但有时候，很恼人的是，有些问题不是你去找，就一定会出答案的。
与其等待，还不如早点想出路，继续下一步的试验，特别是样品已经做好放在冰箱里面，一抗二抗之类的都到货了....趁热打铁啊
同时在想答案也不迟。
DAB 粉剂可以保存很久的，不过除了可以保存起来之外，更建议你和代理讲一下，退货或者换。甚至叫他来做给你看。。。呵呵
顶部
 16  1/2 12››