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标题:【求助】求助BN-PAGE

taoshengyijiu[使用道具]
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发表于 2014-3-19 11:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】求助BN-PAGE


请问跑BN-PAGE时，样品在浓缩胶里很正常，但一旦进了分离胶就停滞不前，而且电压设定为500v，横压，而一旦进入分离胶后，电流不断下降，到最后就只有2mA了，请问是什么原因啊？先谢过了！
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发表于 2014-3-19 11:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

你用什么槽跑的啊，要这么大的电压，后面电流变小到是很正常的事情。
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发表于 2014-3-19 11:02 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

用的是bio-rad电泳槽，内液要150ml电泳液的那种
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发表于 2014-3-19 11:02 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

具体形容一下大小，胶板的大小。不过按照你这个描述的话500v肯定是大了。还有就是你胶浓度的情况，以及样品，bn是个比较繁琐的工作，不是按照protocol就一定能做出你的样品的。
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发表于 2014-3-19 11:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

呵呵，今天又跑了SDS-PAGE，条带都跑出来了，样品是莱茵衣藻的类囊体膜。这就说明样品没有问题，太好了。但前些天跑BN-PAGE老是跑不下来，刚开始用bio-rad（7cm×10cm）的不行，换了mini-ve（10cm×10.5cm）的还是不行，用的是6%-12%的梯度胶，用含山梨糖醇的缓冲液洗类囊体膜，叶绿素的最终浓度是0.5mg/ml，DM的最终浓度是1%。
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发表于 2014-3-19 11:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我下周也跑BN-SDS-PAGE，第一次做，请楼上多多指点一二哟．
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发表于 2014-3-19 11:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

不是吧，怎么现在这么多人做bn，难道做斑马鱼的也开始做bn了。
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taoshengyijiu[使用道具]
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发表于 2014-3-19 11:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

尿素胶跑下来了，但是BN-PAGE跑不下来，大概会是什么原因啊
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taoshengyijiu[使用道具]
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发表于 2014-3-19 11:05 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
做BN-PAGE时，样品在浓缩胶里好好的，一旦到了分离胶就不动了，胶缓冲液和电泳缓冲液的PH值都是7，什么可能导致这个问题啊
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daod[使用道具]
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发表于 2014-3-19 11:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 taoshengyijiu 于 2014-3-19 11:05 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
做BN-PAGE时，样品在浓缩胶里好好的，一旦到了分离胶就不动了，胶缓冲液和电泳缓冲液的PH值都是7，什么可能导致这个问题啊

你是指第二向还跑bn吗？
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