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放射免疫分析法测定血(尿) α1微球蛋白（二）

关键词：北京恒元启天  食品添加剂检测  环保标准样品  进口标准品
  【注意事项】
    1．静脉血分离血清，2～8℃可保存1周，一20℃以下可保存60天。随机尿样4℃保存不超过1周，不宜冰冻保存。
    2．肾功能障碍患者的样品可用缓冲液稀释l倍或多倍，当样品浓度高于160μg／ml时，可将样品稀释5～10倍后测定。
    3．试剂盒于2～8℃避光保存，一般情况下有效期为30天，不同批号试剂不可混用。
    4．操作过程中，加试剂顺序不能颠倒，分析过程中各种试剂取样量要准确。
    5．用于标记的抗原要求纯度高，并有足够或完整的免疫活性，要求抗体特异性强、效价高并有高亲和力。非特异结合率应<5％，标记抗原与抗体的最大结合率(Bo／T)在33％～55%之间较为理想。
6．不同地区、不同实验室、使用不同厂家试剂及不同的方法测定，其参考值有所差异，应建立自己实验室的参考值。
  【评价与思考】
    1．α1-MG测定方法包括单向免疫扩散、放射免疫分析法、酶联免疫分析法、免疫透射比浊法、化学发光免疫分析法等，目前临床上以免疫透射比浊法、化学发光免疫分析法为常用方法。
    2．本实验方法属放射免疫分析法，检测范围5～160μg/ml，灵敏度2μg／ml，批内CV<5％，批间CV<10％，特异性高，灵敏度高，操作简便。
    3．影响本法结果准确性的因素较多  不同批号的标准品间存在的性质差异：标记物在制备后的贮存期间发生标记放射性核素的脱落，标记物自身辐射分解引起变性；抗体贮存条件不当，或使用中反复冻融造成其免疫活性改变；不同批号抗体间的亲和力差异；分离剂的配制不当造成分离效果的差异或在存放期中变质变性；样品自采集、分离、贮存至测定的每个环节都可能引入误差；反应试剂与样品的取样不准，反应条件控制不当；B与F的分离操作掌握不好，都会影响结果的准确性。
    4．放射性测量的仪器要经常校验，标准曲线数学拟合不当，拟合的优度不高，也会影响测量结果的准确性。
    5．目前放射免疫分析法正逐步被化学发光法替代。