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标题:【求助】protein A跟SPA是同一个方法吗？

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发表于 2014-3-26 11:07 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】protein A跟SPA是同一个方法吗？


刚接触这块，想问问大家protein A跟SPA是同一个方法吗？spa是说葡萄球菌蛋白A，在看方法时，两个的方法又不太一样，但总是都好像是说蛋白A，请大家帮帮忙
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发表于 2014-3-26 15:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 BOSS2011 于 2014-3-26 11:07 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

刚接触这块，想问问大家protein A跟SPA是同一个方法吗？spa是说葡萄球菌蛋白A，在看方法时，两个的方法又不太一样，但总是都好像是说蛋白A，请大家帮帮忙 ...

呵呵SPA的全称是 Staphylococcal Protein A就是葡萄球菌蛋白A
叫SPA是比较完整，早些时候的文献合文章都是这样叫的，现在好象各大填料公司都叫proteinA了
早期的proteinA是从天然的金黄色葡萄球菌细胞壁表面提取的，有时叫native proteinA(nproteinA)，它不仅有IgG FC段的结合区域，还有白蛋白的结合区域，不过现在的用的proteinA填料比较好的都是用重组的A蛋白，也叫rproteinA，在克隆时增加了FC的结合区域（比较好的rproteinA理论上可以结合5个IgG），另外通过在某些地方增加一些氨基酸，还增加了A蛋白的稳定性。
补充：另外还有一个相对应的用来纯化抗体的蛋白proteinG ,天然的proteinG上面有白蛋白的结合位点
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发表于 2014-3-26 15:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
那SPA跟protein A亲合膜法的区别呢？
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发表于 2014-3-26 15:48 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

There is no albumin binding domain in native Protien A.
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发表于 2014-3-26 15:48 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


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原帖由 BOSS2011 于 2014-3-26 15:46 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
那SPA跟protein A亲合膜法的区别呢？

protein A亲合膜法
是把proteinA通过化学法共价键固定在膜上，然后用来固定抗体IgG分子，一般用来固定一抗，然后再去捕获抗原分子
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发表于 2014-3-26 15:48 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


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原帖由 831226 于 2014-3-26 15:48 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

There is no albumin binding domain in native Protien A.

好象是我记错了，天然的proteinG上面有白蛋白的结合位点，不好意思
另外我想说，各大公司对自己的天然的proteinA有几个FC结合位点说法不一
有说5个的，有说4个的
但这个是理论上的说法，实际上一个proteinA分子能结合多少个FC，还要看这个immobilize技术的
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发表于 2014-3-26 15:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
protein A亲合膜 和 Protein A agarose 有何不同阿，在应用上有什么优越性么？
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 小中大


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原帖由 831226 于 2014-3-26 15:49 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
protein A亲合膜 和 Protein A agarose 有何不同阿，在应用上有什么优越性么？

亲和膜一般用来做抗体的膜式固相化，然后来结合检测抗原，有点类似ELISA板的96孔来吸附抗原一样，只不过proteinA-FC这个结合力比较牢固，而且有一定的特异性,而且膜机构的你后面能显色暴光等等
proteinA agarose是将proteinA通过共价键结合到琼脂糖上面去，主要用来纯化生产抗体和做IP
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 小中大

我在文献上看到亲和膜也用来做分离的啊，而且还不少
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 小中大

这个亲和膜用来分离是小量微量的IgG，最多ug级别就差不多了
mg级别的IgG分离有谁不是用proteinA的填料的？
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