【求助】蛋白纯化

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标题:【求助】蛋白纯化

loli[使用道具]
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发表于 2014-3-29 10:32 资料个人空间短消息加为好友

小中大

分离某血蓝蛋白两亚组分，分子量分别为400KD和250KD，能否用凝胶过滤分开，请指教，急。

fei1226com[使用道具]
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发表于 2014-3-29 10:32 资料个人空间短消息加为好友

小中大

差这么大按道理是应该可以的，如果你的柱效足够高的话
但分子量有点大啊，可能在全排阻，选好树脂就行了

loli[使用道具]
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发表于 2014-3-29 10:33 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我这方面经验是在不足，敢问树脂选用那种好啊，想选G-200不知道可否？谢谢！

loli[使用道具]
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发表于 2014-3-29 10:34 资料个人空间短消息加为好友

小中大

就是Sephadex G-200

987789[使用道具]
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发表于 2014-3-29 10:35 资料个人空间短消息加为好友

小中大

有预装柱的话，自然是Superdex 200的最好
如果是手装柱，我建议用Sephadex G-150，G-150的分离范围是5-300KD，你的2个组分正好一个走外水，一个走里面，如果你提供的分子量没有其他影响因素的前提下，G-150肯定比G-200效果好。

hold住[使用道具]
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发表于 2014-3-29 10:35 资料个人空间短消息加为好友

小中大

现在GE公司sephadex G100 以上的填料早就停止生产了，现在只供应G75一下的产品主要用于脱盐，楼主如果想订购G150 或G200应该是买不到的，而且这种填料刚性太差，缓冲稍有改变，柱效就会有很大差异，是否有效果还难说；最好是选用superdex 200，它的分离范围是10kd-600kd，肯定能分开你这种蛋白，而且刚性好，不过价格很贵，一根2 .6/60的预装住就要2W左右；你还可以用sephacryl S200 或 S300试一试，S200的希望大些，而且填料也不贵，150ml也就1千多块。

loli[使用道具]
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发表于 2014-3-29 10:41 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 hold住 于 2014-3-29 10:35 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

现在GE公司sephadex G100 以上的填料早就停止生产了，现在只供应G75一下的产品主要用于脱盐，楼主如果想订购G150 或G200应该是买不到的，而且这种填料刚性太差，缓冲稍有改变，柱效就会有很大差异，是否有效果还难说；最好是选用s ...

看得出你对这方面很少在行，麻烦问问superdex200是否可以自己装柱呢？

ero11[使用道具]
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发表于 2014-3-29 10:41 资料个人空间短消息加为好友

小中大

可以自己装,150ml superdex 200的价格在5000左右,可以自己装一个1.6/70的柱子,每次能上样2-4ml

loli[使用道具]
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发表于 2014-3-29 10:42 资料个人空间短消息加为好友

小中大

太谢谢你了！您那儿有各种凝胶过滤填料的资料么，给个链接也好啊，想购买填料实施这个实验前先学习点相关知识，书到用时方知少啊。对于蛋白的纯化比较陌生，希望得到你更多的指教，谢谢！