蛋白质与蛋白组学

我的显影液失效很快，使用时倒入搪瓷盘中，最多两次western时间不超过一周就不能再用了，这是正常的吗？

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显影液用完后赶紧回收到瓶子里，避光，保存。一般一个月还是行的。
如果变成酱油色就不要用了。

我觉得你的发光液和膜接触后应该马上显影，不应该等五分钟。镊子应该没有问题，我一直用金属镊子。但是如果抗体很浓，发光很强的话，最初是可以显示很强的带，后来就会变成空白，是因为发光底物已经消耗光了，而其它比较弱的地方因为还没有消耗光，所以反而还可以显影。
建议你降低二抗浓度，发光液和膜接触后应该马上显影，也可以稀释一下发光液。
另外，感觉你的发光液应该不是很正常，一般用一个月没有问题的。
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使用发光液后，没有发现过膜上有荧光。我会按你的建议试一下。有的时候相同条件也能做出不错的条带，但最近一直有问题。